IMP3基因沉默介導Notch信號通路對結直腸癌上皮間質轉化及血管生成的影響①

肖忠盛 龍 泓 丁成明 肖友忠 劉麗兵

(南華大學附屬第一醫院 胃腸外科，衡陽 421001)

結直腸癌是常見的消化系統惡性腫瘤之一，具有發病隱匿、預后較差的特點，對患者的生命健康造成嚴重威脅[1]。上皮-間質轉化(epithelialmesen-chymal transition,EMT)是生物體內上皮細胞向間質細胞表型轉化的一種生物學過程，已證實與多種惡性腫瘤的侵襲轉移相關[2]。除EMT外，惡性腫瘤非可控的血管新生能力同樣是影響腫瘤生長及侵襲轉移的重要因素[3]。胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3(insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3,IMP3)是人體內高度保守的mRNA結合蛋白[4]。既往研究證實其在乳腺癌、胃癌等多種腫瘤的進展中扮演重要角色[5,6]。但對于其具體機制及是否通過Notch信號通路等下游通路影響腫瘤尚未完全明確。Notch信號通路是一種能夠對腫瘤細胞增殖、凋亡及周期調控等造成重要影響的通路，高表達的Notch通常促進胃癌及結腸癌等腫瘤的形成[7]。本研究在前人研究的基礎上，進一步探討IMP3是否通過Notch信號通路影響結直腸癌的EMT以及血管生成，以期為結直腸癌的治療進一步提供依據。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑及設備 IMP3 shRNA序列及陰性對照序列由華大基因合成；lipofectamin 2000試劑盒購自賽默飛世爾；Notch通路抑制劑BMS-708163購自MedChemExpress有限公司； RIPA裂解液和BCA試劑盒購自碧云天生物技術有限公司；Western blot中抗體均購自Abcam；MTT試劑盒購自Sigma-Aldrich；Transwell小室和Matrigel膠購自上海前塵生物科技有限公司；光學顯微鏡和酶聯免疫檢測儀購自Molecular Device。

1.1.2研究對象 收集2017年1月～2018年2月于我院確診的73例結直腸癌患者腫瘤切除術后的新鮮結直腸癌組織及癌旁組織(距病灶5 cm)?！?br>