雷公藤紅素對卵巢癌細胞增殖、凋亡的影響及作用機制研究

馬著妍，吳田田，吳彤，王悅，張蘊莉

（錦州醫科大學附屬第一醫院 檢驗科，遼寧 錦州 121000）

我國每年約有5.2 萬女性被確診為卵巢癌，約2.2萬人死于卵巢癌，并且過去10年卵巢癌發病呈年輕化趨勢[1]。卵巢癌具有易增殖、侵襲性高等特點，這也往往是臨床治療失效的原因，因此抑制卵巢癌細胞增殖及侵襲是治療卵巢癌的要點與難點之一[2-3]。雷公藤紅素是從我國傳統中藥雷公藤中提取的單體，具有良好的安全性。有學者前期研究發現，其抑制腫瘤血管生成、腫瘤增殖及侵襲效果較好[4-7]。同時有報道顯示，腫瘤細胞發生凋亡可以有效抑制腫瘤生長[8-9]。 但是，雷公藤紅素抑制腫瘤生長是否與細胞凋亡有關鮮有報道。因此，本研究以人卵巢癌細胞株HEYa8作為研究對象，研究雷公藤紅素對HEYa8 細胞增殖和凋亡的影響，并探究其分子機制，以期為臨床攻克卵巢癌提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實驗材料及試劑

雷公藤紅素購自上海Aladdin 公司，HEYa8 人卵巢癌細胞株購自美國ATCC 公司。培養基DMEM 及胎牛血清FBS 均購自美國Gibco 公司，MTT 試劑購自美國ThermoFisher 公司，IGF-1 購自美國R＆D 公司，GSDMS-N 購自美國Santa Cruz Biotechnology 公司，NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18 及CD44 購自美國Abcam 公司，IL-1β、GAPDH、PI3K 及Akt 購自美國Cell Signaling Technology 公司。

1.2 HEYa8 人卵巢癌細胞株培養

將含有12%胎牛血清和1%青鏈霉雙抗的DMEM 培養基培養HEYa8 細胞，置于37℃、5%二氧化碳細胞培養箱培養，根據細胞生長狀態換液及傳代。

1.3 MTT 法測定雷公藤紅素處理的最適濃度及時間

把雷公藤紅素濃度分為8 個梯度，分別為0.00、0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、1.20 及2.40 mg/L（藥物用培養基溶解），并分別作為0.00、0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、1.20 及2.40 mg/L 組。同時也把培養時間分為 5 個梯度，分別為0、12、24、48 及72 h。……