miR-34a-5p靶向AKT1基因對子宮內膜異位癥子宮內膜基質細胞侵襲及自噬的調控

劉敏娟，鄧月秀，馬穎

（1.南方醫科大學珠江醫院婦產科，廣州 510282；2.東莞市人民醫院婦產科，廣東 東莞 523000；3.桂林市婦幼保健院婦產科，廣西 桂林 541001）

子宮內膜異位癥（endometriosis，EM）是指子宮內膜出現在子宮腔外的組織并引起相應的癥狀，最常見部位為卵巢表面及盆腔腹膜。EM組織學上雖是良性疾病，卻具有增生、浸潤、轉移及復發等惡性行為。EM好發于育齡期女性［1］，臨床復發率高［2］，發病機制至今尚不明確［3］。

在惡性疾病的發生發展中，細胞侵襲能力增強及自噬能力降低占據著重要的地位［4］。子宮內膜細胞類似腫瘤細胞的行為是EM病灶形成的關鍵［5］。微小RNA（microRNA，miRNA）是由約22個核糖核酸組成的非編碼RNA，能夠與相應基因的mRNA結合，從而阻斷蛋白編碼基因的表達［6］，對細胞具有重要的調控作用［7］。研究［8］發現，miRNA與EM的發病有關，在EM和非EM患者子宮內膜組織中存在表達差異［9］。前期芯片測序發現，在EM患者子宮內膜組織中miR-34a-5p低表達，而miR-34a-5p與EM的關系鮮有報道，因此，本研究擬探討miR-34a-5p在EM發病過程中是否存在調控作用。

1 材料與方法

1.1 材料

子宮內膜來源于南方醫科大學珠江醫院婦產科因子宮肌瘤等良性疾病及因EM行子宮切除的女性患者。所有患者術前3個月內未使用過外源性激素。本研究經南方醫科大學珠江醫院倫理委員會批準。詳細記錄患者的信息并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 原代提取、分離及培養子宮內膜基質細胞（endometrial stromal cells，ESCs）和腺上皮細胞（endometrial epithelial cells，EECs）：無菌操作剖開離體子宮，刮取內膜組織，行原代細胞提取及分離。用PBS漂洗內膜組織3次，剪碎并加入3 mLⅠ型膠原酶（1 mg/mL，美國Gibco公司）37 ℃消化60 min，每15 min攪拌1次。……