(中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院皮膚科,沈陽 110001)
皮膚鱗狀細胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)是世界上第二常見的皮膚癌,發(fā)病率不斷升高[1]。近年來,我國CSCC的發(fā)病率也逐年升高,發(fā)病年齡呈現(xiàn)年輕化趨勢。CSCC嚴重影響患者的生活質量,給患者帶來了沉重的身心負擔[2]。他汀類是治療中老年人群高脂血癥的常用藥物。近年來,隨著他汀類藥物的廣泛應用和對其作用機制的深入研究,其抗腫瘤的作用受到廣泛關注[3-4]。在肺癌[5]、肝癌[6]、結直腸癌[7]、乳腺癌[8]等方面相關研究取得了一定進展,但他汀類藥物在皮膚腫瘤方面的研究國內鮮有報道。本研究以培養(yǎng)的人CSCC SCL-1細胞為研究對象,觀察氟伐他汀鈉對SCL-1細胞的增殖、凋亡的影響,并探討其可能的分子機制。
人CSCC細胞株 SCL-1由德國柏林自由大學本杰明·富蘭克林醫(yī)學中心惠贈。主要試劑包括氟伐他汀鈉(上海源葉生物科技有限公司)、DMEM細胞培養(yǎng)液(美國Hyclone公司)、胎牛血清(美國Bioscience公司)、噻唑藍(北京索萊寶公司)、二甲基亞砜(美國Sigma公司)、Annexin V/PI凋亡試劑盒(上海優(yōu)寧維有限公司)、Trizol試劑(美國Invitrogen公司)、反轉錄試劑盒(日本Toyobo公司)、實時qPCR試劑盒(日本Toyobo公司)。
1.2.1 氟伐他汀鈉儲存液及工作液配制:用DMSO將氟伐他汀鈉充分溶解,配制成800 μmol/L濃度的母液(DMSO 終濃度≤0.01%),22 μm濾器過濾,4 ℃避光保存;用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液稀釋成含氟伐他汀鈉10、20、50、100 μmol/L的工作液。
1.2.2 細胞培養(yǎng):將 SCL-1細胞培養(yǎng)于含10% 胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中,置于37 ℃、5% CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中。觀察培養(yǎng)基清亮,細胞呈貼壁生長,形態(tài)良好,細胞鋪滿瓶壁 70%~80%可以傳代。……