基質金屬蛋白酶-9、同型半胱氨酸及脂蛋白(a)在急性腦卒中患者中的水平及臨床意義

杜 坤，張 潔，項忠偉，張廣慧△

(上海交通大學醫學院附屬新華醫院：1.檢驗科；2.醫務部，上海 200092)

急性腦卒中是臨床常見的腦血管疾病之一，是由于腦部血管突然破裂或因血管阻塞等急性腦循環障礙導致血液不能流入大腦而引起的腦組織全面性或者局限性功能損傷[1]。根據急性腦卒中發病機制將腦卒中分為缺血性腦卒中(IS)和出血性腦卒中(ICH)，其中大約70%為IS[2]。急性腦卒中具有發病率高、病死率高和致殘率高的特點，是中國成年人殘疾的首要原因之一，對患者造成巨大的痛苦，給家庭、社會均帶來了沉重的負擔[3]。腦卒中與高血壓、糖尿病、血脂異常、炎性反應等多種危險因素相關，是多種疾病共同作用的結果[4-6]。本研究通過對急性腦卒中患者血清中基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)、同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白(a)[Lp(a)]水平進行測定，探討急性腦卒中患者檢測MMP-9、Hcy、Lp(a)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年7月至2019年1月本院急診中心收治的經頭顱電子計算機斷層掃描、磁共振成像等影像學檢查確診的急性腦卒中患者203例納入腦卒中組，其中IS患者165例，ICH患者38例；男103例，女100例；平均(75.34±12.06)歲；體質量指數(BMI)為(22.16±2.41)kg/m2。記錄患者入院時的美國國立衛生研究所腦卒中量表(NIHSS)評分，根據NIHSS評分將患者分為輕度組(NIHSS<5分)72例，中度組(NIHSS為5～15分)70例和重度組(NIHSS>15分)61例。選取同期體檢健康者100例納入對照組，其中男53例，女47例；平均(67.40±9.24)歲;BMI為(21.75±2.19)kg/m2。排除標準： (1) 合并惡性腫瘤、代謝及免疫疾病患者。(2) 合并各種感染性疾病，1年內患過心肌梗死或進行過大手術的患者。(3)大面積腦梗死及其他腦血管疾病患者。腦卒中組與對照組性別構成比、年齡、BMI比較，差異無統計學意義(χ2=0.025，P=0.998；t=0.784，P=0.218；t=0.134，P=0.079)，具有可比性。

1.2隨訪觀察 對所有患者進行6個月的隨訪觀察，記錄發生不良事件的患者例數，不良事件包括死亡、再梗死入院等，發生不良事件的患者49例(24.1%)。

1.3標本采集 患者入院后第2天及健康體檢者體檢當日清晨采集空腹靜脈血3～5 mL(無抗凝劑)，4 ℃ 4 000 r/min離心10 min分離血清，分離得到的血清置于-80 ℃冰箱保存待測。所有操作均嚴格按照相關標準操作進行。

1.4檢測方法 Hcy使用四川邁克生物科技公司試劑盒，采用循環酶法進行檢測。Lp(a)使用日本wako原裝試劑，采用免疫比濁法進行檢測。Hcy和Lp(a)的檢測均在日立7600全自動生化分析儀上進行。降鈣素原使用羅氏公司原裝試劑盒，采用電化學發光法檢測，在羅氏cobas e411電化學發光全自動免疫分析儀上進行。MMP-9使用上海鈺森生物技術有限公司試劑盒，采用酶聯免疫吸附試驗法，使用科華KHBST-360酶標儀進行檢測讀數。

2 結 果

2.1腦卒中組和對照組一般情況比較 兩組有無高血壓史、吸煙史患者比例，空腹血糖、三酰甘油、D-二聚體(D-D)、Hcy、載脂蛋白(a)、白細胞計數、C反應蛋白、降鈣素原、MMP-9、Lp(a)水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2不同NIHSS評分組患者MMP-9、Hcy、Lp(a)水平比較 重度組和中度組患者血清中的MMP-9、Hcy、Lp(a)水平均明顯高于輕度組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.3患者血清MMP-9、Hcy及Lp(a)與NIHSS評分的相關分析 Pearson相關分析結果顯示，患者血清MMP-9、Hcy及Lp(a)與NIHSS評分呈顯著正相關(r=0.572、0.475、0.590，P=0.001)。

2.4腦卒中患者發生不良事件影響因素的Cox回歸分析 以腦卒中患者入院時MMP-9、Hcy及Lp(a)的表達水平為因變量，以6個月內發生不良事件的發生率為自變量進行Cox回歸分析，結果顯示患者入院時MMP-9、Hcy、Lp(a)表達水平均是影響腦卒中患者預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表1 腦卒中組和對照組一般情況比較

組別nHcy(x±s,μmol/L)載脂蛋白(a)(x±s,mg/dL)白細胞計數(x±s,×109/L)血紅蛋白(x±s,g/L)C反應蛋白(x±s,mg/L)降鈣素原(x±s,ng/mL)MMP-9(x±s,ng/mL)Lp(a)(x±s,mg/dL)腦卒中組20320.48±8.6937.77±23.9410.98±6.24127.53±23.3414.95±8.480.071±0.042125.11±60.0534.53±10.47對照組10010.15±4.1913.16±9.306.72±2.47134.82±16.155.23±3.650.046±0.01369.21±15.1321.75±6.24χ2/t0.1872.4730.3480.4311.3051.6380.4551.943P0.0010.0010.0010.0540.0010.0010.0010.001

表2 3組NIHSS評分患者的MMP-9、Hcy、Lp(a)水平比較

表3 腦卒中患者發生不良事件影響因素的Cox回歸分析

3 討 論

根據2016年全球疾病負擔(GBD)研究數據顯示腦卒中是目前我國病死率最高的疾病，每年有195萬例新發病例[7]。有研究結果顯示，腦卒中與動脈血壓、動脈斑塊、腦組織應激反應和腦血管內炎性反應均相關[8]。

MMP-9作為近年來研究的熱點，其通過降解細胞外基質，導致血腦屏障的破壞，在腦缺血損傷中發揮了重要的作用，被認為是腦血管疾病過程中最重要的因子之一，參與了腦卒中的炎性反應，是急性腦梗死重要的病理基礎[9-11]。有學者研究發現，MMP-9水平也與腦卒中的嚴重程度呈正相關，NIHSS評分高的患者，MMP-9水平較高[12-13]。近年來Hcy作為一種新型的腦卒中危險因素逐漸被人們重視，Hcy通過損傷血管平滑肌細胞和內皮細胞，誘導內皮細胞及凝血酶的激活，提高血小板的黏附聚集能力和組織因子活性，從而可以促進血管內血栓形成[14]。有研究發現，Hcy可以使動脈內膜增厚，促進動脈斑塊的形成，與動脈粥樣硬化的發生、發展密切相關，是腦卒中的主要危險因素之一[15]。與Hcy類似，Lp(a)也主要通過血管內皮損傷，使血管壁發生氧化應激，刺激產生細胞因子，促進泡沫細胞的產生，同時Lp(a)可與血漿纖溶酶原競爭結合血管內皮細胞表面的受體，阻礙正常的血管內纖維蛋白原的溶解，對動脈斑塊的形成和維持都發揮重要的作用[16]。

本研究結果顯示，有高血壓史、吸煙史患者比例，空腹血糖、三酰甘油、D-D、Hcy、載脂蛋白a、白細胞計數、C反應蛋白、降鈣素原、MMP-9、Lp(a)水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)，提示高血壓、糖尿病、血脂異常、炎性反應等多種因素均參與腦卒中疾病的發生和發展，加強對血壓、血糖、血脂和炎性反應因素等可調控因素的控制，可以有效降低腦卒中發生的風險。本研究根據急性腦卒中患者入院時的NIHSS評分情況，將患者分為輕度組、中度組和重度組，發現隨著患者NIHSS評分的增加，血清MMP-9、Hcy、Lp(a)水平明顯增加，且三者水平與NIHSS評分呈明顯正相關。

有研究發現，MMP-9水平也是腦卒中預后的獨立預測因素，MMP-9水平與腦卒中后出血的風險密切相關，發生腦卒中后出血的患者中MMP-9水平明顯升高[17]。本研究通過對急性腦卒中患者進行隨訪發現，患者入院時的MMP-9、Hcy、Lp(a)的表達水平與6個月內的不良事件發生率密切相關，是腦卒中患者預后的獨立危險因素。

同時，本研究還存在一定的不足：(1)本研究樣本量較小，且缺乏多中心研究，具有一定的片面性。(2)本研究為橫斷面研究，雖然對患者進行了隨訪，但是未能監測相關生物標志物的動態變化，以及探討這些動態變化是否會對腦卒中患者的預后產生影響，因此，需在今后的工作中繼續深入研究。

4 結 論

血清MMP-9、Hcy及Lp(a)水平升高與急性腦卒中密切相關，可以反映急性腦卒中的嚴重程度，是腦卒中患者預后的獨立危險因素，控制其水平有助于對腦卒中進行預防，以及改善其預后。