論轉基因食品檢測方法

溫善萍　蔣小英　趙玉芬

摘 要：本文簡單介紹了幾種常見的檢測方法，并以轉基因大豆為例，詳細分析了熒光PCR檢測、定性PCR檢測的應用。以期利用先進檢測技術，保證轉基因食品安全，推動農業事業發展。

關鍵詞：轉基因;食品安全;檢測方法;PCR檢測

如今轉基因食品受到了多個國家的重視，轉基因食品包括對植物基因升級改造的農作物，和對轉基因植物進一步加工得到的供消費者食用的食品。隨著人們對食品安全的關注，人們對轉基因食品抱有不同態度，在贊嘆科學技術發展的同時，也在擔憂轉基因食品的安全性，對轉基因食品存在一定偏見。

1 我國轉基因農作物種植現狀

轉基因作物是通過基因工程改變農作物的基因組，形成新的生物體。將轉基因生物體進一步加工即為轉基因食品。其中最常見如轉基因豆油、轉基因玉米等。目前我國轉基因食品種植面積約為280萬公頃，在全世界排名第八，主要種植轉基因棉花、番茄、玉米等。

隨著轉基因農作物進入市場，其安全性引起了社會公眾的關注。轉基因食品的安全爭議主要集中在：①種植農作物是否會增加雜草和病蟲害問題，種植廢棄物是否會污染環境。②轉基因食品對人體健康的影響，是否存在副作用和毒害物質，導致后代不育等?，F階段我國對轉基因生物的管理十分嚴格，為了保護公民的健康和合法利益，避免生態環境受到威脅，我國針對轉基因生物安全設定了多條管理辦法，嚴格要求各企業對轉基因產品做出標志，在市場監管中嚴格管理。

2 轉基因食品檢測面臨的困難

檢測轉基因時面臨著諸多挑戰，首先是檢測復合轉基因品系，如今復合轉基因已經出現由五個轉化體雜交得來的品系，以轉基因玉米為例，已經培育出Bt11與MIR604、GA21、TC1507以及MIR162雜交的品種，現階段檢測技術并不能對轉基因品系進行區分。檢測轉基因材料含量降低的食品時，尤其是深加工食品，由于DNA經過了嚴重降解，并不能保證完整檢出。此外部分正處于田間試驗階段或者研發階段的轉基因作物，在非法途徑下轉到市場或田地，對于其并不具備較完善的檢測方法進行檢測，容易發生漏檢的情況。

目前針對轉基因作物的檢測主要從定性檢測和定量檢測兩方面展開，其中PCR檢測作為最常用的檢測技術，能夠提供較為準確的檢測結果。目前市場上轉基因植物主要是玉米和大豆，針對大豆、玉米及其深加工食品的檢測，主要使用PCR檢測技術，通過擴增產物，完成測序分析，對其安全性進行判斷[1]。

3 轉基因食品檢測方法

3.1常見檢測方法

3.1.1 光譜分析法

使用該檢測法，需要繪制光譜圖，在軟件幫助下模擬分子結構，對比非轉基因食品，展開非期望效應研究。將分析結果作為評價依據，得到最終檢測結果。目前該技術主要應用于玉米和番茄的檢測，可實現無損快速檢測，檢測過程對環境無污染，已經在多個食品分析中廣泛應用[2]。

3.1.2 蛋白質印跡檢測法

蛋白質印跡檢測主要是利用電泳技術分離外源蛋白質，然后實現分離檢測。檢測轉基因食品中的不可溶蛋白質時，可使用該技術，測定蛋白質含量，同時與蛋白質標準進行對比，判斷轉基因食品的安全性。

3.1.3 PCR檢測法

PCR檢測法是通過擴增目標序列，檢測擴增產物，可分為定性PCR技術、PCR-ELISA技術及復合定性PCR等。定性PCR是擴增特異DNA片段，利用瓊脂糖凝膠分離產物，借助于凝膠成像系統觀察分離情況，該技術具有較高的靈敏度。

3.1.4 基因芯片檢測法

使用基因芯片技術檢測食品，將食品生物體作為樣本，測定其基因序列，將DNA按照一定規律和順序排列，形成微矩陣。使用軟件對基因序列進行分析，了解基因特點和信息，對基因表達特征進行檢測，確認轉基因食品的安全性。

3.1.5 組學分析技術

結合蛋白組學、代謝組學以及轉錄組學技術，針對個體展開組學分析，對單個細胞內蛋白質的表達情況進行分析。組學分析法作為新型技術，可評價樣本非期望效應，識別轉基因食品危害性。該技術具有適應性強的優勢，可在食品檢測中推廣應用。

3.1.6 生物傳感器技術

將電子裝置和生物特性結合，充分發揮生物分子之間的互相作用，并將其轉換為顯示信號，如離子共振傳感器等，通過對折射率變化的檢測，對樣品轉基因成分進行檢測。

3.2 定性PCR檢測方法

3.2.1 實驗材料

準備轉基因大豆，使用研缽磨成粉末，取粉末100 g，使用CTAB法提取基因組。將提取后的DNA溶液放置在-20 ℃環境中儲存?；罨瘍龃婢?，提取陽性質粒分子，在-20℃環境中儲存。

3.2.2 設計PCR檢測引物

一般情況下引物選擇18～27 bp長度，含量約為40%～60%，保持上下游引物接近。PCR檢測過程中注意對DNA模板量加強控制，若模板量過大，會造成PCR擴增受抑制，過少會影響檢測準確性[3]。若樣品不足

200 ng/μL，加樣量設定為0.25 μL。

3.2.3 電泳檢測

在PCR儀器中經過升溫和降溫過程循環后，會產生氣溶膠擴增產物。打開管蓋前將PCR管放置在通風櫥內，通風3 min后拿出產物進行電泳檢測。電泳檢測中要使用新移液器添加樣本，移液器要攜帶濾芯，避免對氣溶膠造成污染。由于擴增產物處于100～200 bp，為了提高擴增效果，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，并設置對照組，使用凝膠成像儀對電泳結果進行觀察。

3.2.4 實驗結果

通過對比空白對照組，可發現大豆基因組擴增后和預期產物相近，滿足質量檢查結果。對轉基因大豆進行PCR檢測，基因序列具有高度特異性，可滿足定性檢測需求，完成轉基因成分的定性檢測。

3.3 探針熒光PCR檢測

使用探針熒光PCR時，探針退火溫度相對高，會比PCR引物先在模板上結合。進行PCR時，當PCR循環數增加，熒光信號增強，通過檢測熒光信號完成對檢測模板的定量分析。這種方法具有較高的特異性和靈敏度，檢測時長短，可準確測量轉基因食品的質量。樣本制作方法和前文一致，將DNA溶液稀釋至200 ng/μL，在-20℃環境中保存。將轉基因大豆基因組稀釋后，對基因進行熒光擴增，每個梯度均需要設置兩組重復試驗，并繪制擴增曲線，建立大豆基因標準曲線，測定轉基因品系含量，從而判斷轉基因產品的質量。

4 結論

綜上所述，隨著轉基因食品的發展，檢測技術也需要進一步升級優化，利用先進的檢測技術能夠提高檢出效率，確保食品安全。

參考文獻

[1]張振鐸.轉基因食品質量安全檢測技術的發展研究[J].現代食品，2019（24）：135-137，148.

[2]梁景瀟.轉基因食品檢測方法研究[J].食品安全導刊，2019（30）：150.

[3]常志遠.轉基因食品分子生物學檢測方法的建立及應用[D].長春：長春理工大學，2019.