hMOF對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

齊躍，葉秋霖，劉娟娟，林蓓

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科，沈陽 110004）

子宮內(nèi)膜癌是子宮內(nèi)膜上皮源性惡性腫瘤，占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的20%～30%。近年來，其發(fā)病率和病死率呈上升趨勢，發(fā)病年齡亦趨于年輕化［1］。組蛋白乙酰化修飾是重要的表觀遺傳學(xué)修飾之一，可通過改變某些特殊位點(diǎn)的組蛋白與DNA的某些區(qū)域結(jié)合的緊密性，從而改變相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，影響轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)［2］。組蛋白乙酰化修飾受乙酰化酶和去乙酰化酶的雙重調(diào)節(jié)［3］，hMOF是組蛋白乙酰化酶三大家族中MYST家族的重要成員［4］，又被稱為MYST1或賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶8（lysine acetyltransferase 8，KAT8）。hMOF基因定位于人染色體16p11.2，編碼467個(gè)氨基酸，分子量52.4×103。hMOF參與胚胎發(fā)育、維護(hù)染色體的穩(wěn)定性［5］、DNA損傷修復(fù)［6-7］、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等多種重要基礎(chǔ)生命過程，hMOF表達(dá)異常亦影響多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后［8-9］。而hMOF在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況尚未見報(bào)道。本研究采用小干擾RNA（small intefering RNA，siRNA）

技術(shù)抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中hMOF的表達(dá)，檢測細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和侵襲能力的改變，為組蛋白乙酰化修飾成為子宮內(nèi)膜癌新的治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞系：人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Ishikawa購于中國科學(xué)院上海生命科學(xué)院細(xì)胞庫，由盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科實(shí)驗(yàn)室保存。

1.1.2 主要試劑：hMOF鼠抗人單克隆抗體（美國GeneTex公司）；GAPDH鼠抗人單克隆抗體、HRP標(biāo)記山羊抗小鼠IgG、HRP標(biāo)記山羊抗兔IgG（北京中杉金橋試劑公司）；RPMI 1640培養(yǎng)基、胎牛血清（美國Gibco公司）；胰酶、DMSO（美國Sigma公司）；TRIzol試劑、Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染試劑（美國Invitrogen公司）；MTT（中國Solarbio公司）；細(xì)胞周期試劑盒、Annexin-Ⅴ-APC/7AAD試劑盒（中國凱基公司）；……