ASB14通過調(diào)控泛素化介導的線粒體自噬改善小鼠心力衰竭

王澈，楊宏輝，李慶民，杜秋波，朱利杰，李清曼，張彩麗

（河南省人民醫(yī)院，阜外華中心血管病醫(yī)院，鄭州大學人民醫(yī)院心內(nèi)科，鄭州 450000）

隨著我國人口老齡化的加快，心力衰竭的患病率逐年升高。心力衰竭誘發(fā)的心肌肥厚常伴隨著心肌細胞中蛋白質(zhì)的分解及合成，保持蛋白質(zhì)分解與合成之間的平衡是維持心臟功能的重要條件［1-3］。研究［4］證實，泛素蛋白酶體系統(tǒng)（ubiquitin proteasome system，UPS）在主動脈瓣狹窄模型中出現(xiàn)心肌泛素化蛋白水平升高，說明心衰過程中存在心肌泛素化過程。

線粒體自噬是一個特異性選擇的過程，受多種基因和蛋白調(diào)控［5］。研究［6］發(fā)現(xiàn)，心力衰竭模型中線粒體自噬不足可能會加重心肌損傷，同時E3泛素連接酶Parkin的低表達可能導致心肌細胞中線粒體功能的失調(diào)及心律失常的加重，說明泛素化降解介導的線粒體自噬在心力衰竭中發(fā)揮至關重要的作用。

錨蛋白重復序列和抑制細胞因子信號盒（ankyrin repeats and suppressor of cytokine signaling box，ASB）14是ASB家族中的成員之一，本研究旨在構建壓力負荷誘導的心力衰竭小鼠模型，利用ASB14基因的腺相關病毒轉染小鼠，上調(diào)其心臟組織中ASB14表達，探討ASB14參與心力衰竭發(fā)生及發(fā)展可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組

SPF級C57BL/6雄性小鼠40只，體質(zhì)量30～35 g，購自遼寧長生生物有限公司［SCXK（遼）：2017-0001］；小鼠分籠飼養(yǎng)，自由進食和飲水，室溫維持在20～25℃，每日光照12 h。在適應性飼養(yǎng)1周后，采用隨機數(shù)字法將小鼠隨機分為假手術（Sham）組、模型（Model）組、模型+ASB14-siRNA載體（siRNA）組及模型+ASB14腺相關病毒轉染（ASB14）組，每組10只。

1.2 主要試劑

ASB14腺相關病毒及ASB14-siRNA表達載體購自上海吉瑪生物科技有限公司；……