水楊酸鈉誘導(dǎo)大鼠耳蝸中DAPK1表達改變

翟思佳 黃巧 廖行偉 劉宇超 尹時華

廣西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科(南寧530000)

水楊酸鈉作為臨床常用藥品之一，特別是在西方國家被廣泛大量使用。大劑量的水楊酸鈉可以對從耳蝸到中樞神經(jīng)的不同聽覺系統(tǒng)層次造成聽覺損害，對耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)的損傷尤甚[1,2]，并可體現(xiàn)在聽性腦干反應(yīng)（ABR）和畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)的改變[3,4]。水楊酸鈉對聽覺系統(tǒng)毒副作用中最明顯的三大癥狀是耳鳴、聽力下降和言語認(rèn)知能力減低[5]，長期的臨床實踐發(fā)現(xiàn)水楊酸鈉可以引起可逆性的耳鳴，有文獻報道給予水楊酸鈉200mg/日，持續(xù)兩周，即可建立耳鳴動物模型[6]。目前對于水楊酸鈉的作用機制尚未完全明確，尚需進一步研究。

死亡相關(guān)蛋白激酶1(death associated protein kinase 1，DAPK1)是一種鈣調(diào)蛋白調(diào)節(jié)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與機體多種病理生理過程[7]，其缺失與癌癥、炎癥[8]、腦卒中[9]、動脈粥樣硬化、阿爾茨海默病[10]等疾病密切相關(guān)。那么DAPK1是否也參與了在水楊酸鈉誘導(dǎo)聽覺損害的過程呢？為此，本研究采用水楊酸鈉誘導(dǎo)聽覺損傷建立大鼠模型，通過ABR、DPOAE等電生理方法、HE染色及免疫組化等形態(tài)學(xué)方法檢測耳蝸的病理生理變化；基于DAPK1的轉(zhuǎn)錄表達情況，探討水楊酸鈉能否調(diào)控DAPK1表達。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

1.1.1 實驗動物

40只耳廓反應(yīng)靈敏，未暴露于噪聲及耳毒性藥物環(huán)境的健康雄性SD大鼠(體重約300 g)購自廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。

1.1.2 主要試劑

DAPK1兔抗鼠多克隆抗體購自boster公司；SBAC二抗試劑盒購自boster公司；……