炙甘草多糖對小鼠巨噬細胞再極化的影響①

馮 磊 李 響 孟繁平 李 妍 (延邊大學醫學院免疫學教研室，延吉 133002)

血液中單核細胞被募集分布于組織成為巨噬細胞(macrophage)，組織微環境中巨噬細胞通過經典極化的途徑和選擇性極化的途徑分別向M1型和M2型極化[1]。在細胞因子IFN-γ、病原體成分脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)等刺激下，巨噬細胞向M1型極化，其細胞膜CD40、CD80和CD86等表達增加，并分泌促炎因子，抗病原體和抗腫瘤效應增強。而M2型極化后CD40、CD80和CD86等表達減少，CD206表達增加；其抗原提呈和介導炎癥活性下降，免疫調節、促進組織修復作用增強[2]。M1型和M2型是活化巨噬細胞的兩個極端狀態，其分化受到復雜環境的調節。M2 型可再極化為M1 型，反之亦然。腫瘤微環境中(tumor microenvironment，TME)的腫瘤相關巨噬細胞(tumor associated macrophage，TAM)傾向于M2型極化，分泌TGF-β、IL-10、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和基質金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP9)等細胞因子[3]。研究表明，局部TAM數量多與腫瘤患者癌轉移復發快、生存期短密切相關[4]。篩選逆轉M2極化的制劑，對干預TAM分化，輔助腫瘤治療具有重要意義。前期研究發現炙甘草的中等分子量多糖(medium molecular weight polysaccharide from roasted radixglycyrrhizae,MPRR)具有較強活化巨噬細胞的作用[5]。本研究通過探討IL-4誘導巨噬細胞向M2型極化，并檢測MPRR對其再極化的調節，闡明不同極化型巨噬細胞對腫瘤細胞生長的影響。

1 材料與方法

1.1材料 小鼠RAW264.7巨噬細胞和小鼠4T1乳腺癌細胞引自美國標準生物品保藏中心。胎牛血清購自黃巖四季青有限公司。1640 培養液購自美國 Gibco 公司。藻紅蛋白(phycoerythrin，PE)標記抗體(CD86、CD206 )和PE標記同型對照抗體購自天津三箭生物技術有限公司。羧基化聚苯乙烯熒光微球 (fluospheres carboxylate yellow-green 505/515)購自美國賽默飛公司。……