趨化素樣因子超家族成員6在膠質瘤中的表達及臨床意義①

韋 俐 楊小駿 王 琦 鄭 曉 徐 斌 蔣敬庭 (蘇州大學附屬第三醫院腫瘤生物診療中心，江蘇省腫瘤免疫治療工程技術中心，蘇州大學細胞治療研究院，常州 213003)

腦膠質瘤在所有顱內腫瘤中發生率最高，五年病死率在全身腫瘤中僅次于胰腺癌和肺癌。最大范圍手術切除和術后放化療是目前膠質瘤的標準治療方案，但效果欠佳。近年來，免疫治療和靶向治療在惡性腫瘤中的應用取得了進展，其中研究較多的是PD-1/PD-L1免疫抑制信號通路。趨化素樣因子超家族成員6(chemokine-like factor 6，CMTM6)作為CMTM家族的一員，參與腫瘤的免疫應答，是PD-L1的關鍵調控因子[1]。本研究采用免疫組化、免疫熒光、Western blot和qRT-PCR，檢測腦膠質瘤組織及膠質母細胞瘤細胞系中CMTM6的表達，分析其與臨床病理特征及預后生存之間的關系，為膠質瘤的免疫靶向治療提供新的靶點。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1組織標本 收集蘇州大學附屬第三醫院2018年1月～2019年6月經病理確診及手術切除的膠質瘤組織樣本46例(切除深部良性腫瘤手術入路中必須切除的表面無功能皮層組織)，其中低級別組14例(WHOⅠ～Ⅱ級)、高級別組32例(WHOⅢ～Ⅳ級)，正常對照腦組織9例，所有樣本采集通過蘇州大學附屬第三醫院倫理委員會審核。

1.1.2試劑 CMTM6 Antibody(NBP1-31183,Nov-us)；GFAP、DAPI(GB12096/G1012,Service)；HRP偶聯二抗(Bioworld)；引物(Servicebio)。

1.1.3標準細胞系 人膠質母細胞瘤細胞系U87和U251(中科院上海細胞研究所)，人腦正常膠質細胞系HEB(中科院典型培養物保藏委員會細胞庫)。

1.1.4組織芯片 人腦膠質瘤組織芯片HBraG171 Su01(上海芯超生物科技有限公司)。

1.2方法

1.2.1免疫組化染色 術中取組織經甲醛固定、石蠟包埋、切片、脫蠟、水化、抗原修復、封閉等處理后，加CMTM6一抗(1∶200稀釋)，4℃過夜；……