茯苓酸通過上調(diào)miR-133a影響子宮肌瘤細(xì)胞增殖凋亡及表皮生長因子的水平

王 佳 梁葵香 劉艷妮 楊延冬 (濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，濱州 256603)

子宮肌瘤是育齡期婦女中常見的一種盆腔腫瘤，其臨床表現(xiàn)主要為月經(jīng)過多、習(xí)慣性流產(chǎn)等，發(fā)生率逐年升高[1]。研究表明子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡與子宮肌瘤的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)[2]。因而基于子宮肌瘤發(fā)病機(jī)制研發(fā)治療該疾病的有效藥物具有重要意義。相關(guān)報(bào)道指出茯苓具有活血化瘀的功效并可用于治療子宮肌瘤、慢性盆腔炎、子宮內(nèi)膜異位等婦科疾病，但具體作用機(jī)制尚未可知[3,4]。研究表明茯苓酸(pachymic acid，PA)是中藥茯苓的有效成分，具有抗炎、抗腫瘤等作用，并可通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移等生物學(xué)過程發(fā)揮抗癌作用[5]。但PA對(duì)子宮肌瘤抑制作用的研究尚未見報(bào)道。微小RNA-133a(microRNA-133a，miR-133a)在結(jié)直腸癌細(xì)胞中呈低表達(dá)，上調(diào)miR-133a的表達(dá)可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移及侵襲[6]。但PA是否能夠通過調(diào)控miR-133a的表達(dá)從而影響子宮肌瘤發(fā)生發(fā)展過程尚未可知。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associatedmacrophage，TAM)分泌的表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)可通過促進(jìn)表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)表達(dá)從而促進(jìn)上皮性卵巢癌轉(zhuǎn)移[7]。本研究采用PA作用于子宮肌瘤細(xì)胞，探究其在體外抑制子宮肌瘤細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用機(jī)制，分析其對(duì)miR-133a表達(dá)的調(diào)控作用及其對(duì)EGF水平的影響，為PA在子宮肌瘤治療方面提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1材料與試劑 PA購自上海晶都生物技術(shù)有限公司；DMEM培養(yǎng)基購自美國Thermo Fisher公司；胎牛血清(fetalbovine serum，F(xiàn)BS)購自美國依科賽生物公司；蛋白提取試劑盒均購自陜西碧云天生物工程有限公司；……