酸脫鈣組織蘇木素-伊紅染色前處理改良方案

姚莉洪 張美 黃美暢 萬梓欣 張偉龍 楊肖 楊名仲 陳宇 湯亞玲

口腔疾病研究國家重點實驗室 國家口腔疾病臨床醫學研究中心四川大學華西口腔醫院病理科，成都 610041

口腔頜面部由于解剖結構的特殊性，送檢標本中通常會含有牙、骨組織、骨腫瘤及鈣化病灶，因此，在病理制片前需用脫鈣劑去除骨組織中的鈣鹽再進行切片。目前，使用較多的脫鈣劑有以硝酸為主的酸性脫鈣劑和以乙二胺四乙酸二鈉（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）為代表的螯合脫鈣液。EDTA較溫和，染色效果較好，但組織滲透性差，脫鈣耗時長，影響其應用及推廣[1]。因此，人們開始嘗試使用方便、耗時短的酸類脫鈣劑，其中硝酸是病理工作中使用最廣的酸類脫鈣劑[2]。硝酸脫鈣迅速，得到臨床醫生認可。但硝酸是強酸，對組織有酸化作用，致使常規蘇木素-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色后胞漿著色濃、胞核著色淺，組織細胞顯微結構模糊，切片效果差。本研究旨在探究牙、骨等硬組織酸脫鈣標本HE染色前處理方法，改善硬組織因酸脫鈣后pH變化而引起的切片質量欠佳及HE染色組織結構不清的現象。

1 材料和方法

1.1 標本來源

隨機選取2015年1—6月四川大學華西口腔醫院病理科手術送檢的口腔頜面部來源的含硬組織標本20例。

1.2 處理方法

10%硝酸脫鈣液對硬組織標本進行脫鈣，脫鈣完成判斷標準如下。1）物理方法：用手觸及標本柔軟、不刺手或大頭針無阻力刺入組織標本[3]。2）化學方法：5%氫氧化銨儲存液和5%草酸銨儲存液配制檢測工作液，與脫鈣液混合，若無沉淀則脫鈣完全。……