沈陽地區50例聽力損失兒童及其父母耳聾基因芯片篩查結果分析

王晶，惠蓮

（中國醫科大學附屬第一院耳鼻喉科，沈陽 110001）

研究［1］發現，耳聾不僅可以由單一基因突變或不同基因的復合突變引起，也可以由環境因素（如醫療、環境暴露、創傷和藥物等），或基因突變與環境因素共同作用導致。

KALATZIS等［2］和MORTON等［3］發現，遺傳性耳聾中有75%～80%為常染色體隱性遺傳，18%～20%為常染色體顯性遺傳，其余為X連鎖遺傳/線粒體DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）母系遺傳或染色體疾病。我國遺傳性耳聾患者涉及的主要是mtDNA、SLC26A4、GJB2和GJB3這4種基因的突變。其中，mtDNA基因突變主要包括1494M、1555M，SLC26A4基因突變主要包括IVS7-M、2168M，GJB2基因突變主要包括35M、176M、235M和299M，GJB3突變主要以538M為主。

基因檢測手段在新生兒先天性耳聾篩查中日益得到推廣［4］，基因篩查有助于確定高危人群，及早發現可能的晚發性聽力損失，還可使患者及家庭成員獲得更有效的基因咨詢。本研究對沈陽地區50例聽力損失兒童及其父母進行了耳聾基因檢測，旨在了解該地區先天性耳聾患者的致聾基因類型。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 臨床資料：選擇2018年1月至3月在潮州凱普生物化學有限公司進行耳聾基因檢測的50個沈陽地區家庭，包括50例患兒及其父母，共150例受檢者。患兒年齡5個月～13歲，女19例，男31例。

1.1.2 試劑和儀器：耳聾易感基因檢測試劑盒（PCR+導流雜交法）由潮州凱普生物化學有限公司提供。ABI 9700 PCR擴增儀購自美國生物應用公司。

1.2 方法

抽取被檢者靜脈血2 mL于無菌抗凝管中（EDTA抗凝），立即低溫保存送檢。取100 μL血液樣本提取DNA，取2 μL作為模板。利用生物素標記的引物對耳聾易感基因mtDNA、SLC26A4、GJB2和GJB3的突變部分進行特異性擴增，然后在導流雜交儀上將擴增產物與不同突變類型耳聾易感基因探針雜交膜進行導流雜交，通過化學顯色對結果進行判讀。……