強制性運動療法對腦缺血大鼠認知功能的影響及其作用機制

李美璇，董炳超，王曉銀，程希，趙傳勝，趙珊珊

（中國醫科大學附屬第一醫院神經內科，沈陽 110001）

強制性運動療法（constraint-induced movement therapy，CIMT）是在生活環境中一定程度上限制患者使用健側的肢體，從而強制其反復使用患肢的療法。CIMT已被廣泛地應用于康復領域，并在臨床試驗中被證實能夠有效地促進腦卒中后患者的肢體功能恢復［1-2］。前期腦缺血動物實驗［3-6］發現，CIMT除了能夠促進腦缺血后大鼠的運動功能恢復，還能夠顯著地增加腦缺血后的神經再生與軸突再生，并促進腦缺血后認知功能的恢復。目前對于CIMT改善腦缺血后大鼠認知功能的作用機制尚無相關研究報道。已有許多研究［7-10］表明，沉默信息調節因子1（silent information regulator 1，SIRT1）和腦源性神經營養因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）在改善腦缺血后認知功能方面具有重要的作用，本研究通過檢測CIMT對腦缺血后大鼠海馬區域SIRT1及BDNF表達的影響來探討其改善腦缺血后大鼠認知功能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物、試劑及分組

成年雄性Wistar大鼠（200～250 g）購自北京維通利華實驗技術有限公司，維持飼養環境室溫25 ℃左右，術前12 h禁食，自由飲水。內皮素1（endothelin-1，ET-1）購自美國Sigma公司；SIRT1以及BDNF抗體購自美國Abcam公司；Alexa 568、Alexa488 免疫熒光二抗購自美國Invitrogen公司。將大鼠隨機分為3組：假手術組（Sham組）、缺血組（ISC組）、缺血后給予CIMT組（ISC+CIMT組），每組8只。

1.2 方法

1.2.1 大鼠局灶性腦缺血模型制備［5］：參照大鼠腦解剖圖譜，使用立體定位儀將ET-1注射到大鼠大腦皮質運動區及紋狀體區域以制作局灶性腦缺血模型。使用微量注射器將ET-1（0.5 μL/min）注入以下3個位點［2 μL/點，前囟為中心……