肺炎患者痰液分離鮑曼不動桿菌耐藥基因分析*

戴曉玥，吳亮，陰晴，夏雯，鄒治情，周亞玲，何蕾，Dinsh Kumar K, 許化溪

(1. 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013；2. 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇鎮(zhèn)江 212001)

鮑曼不動桿菌(Acinetobacterbaumannii)屬于不動桿菌屬，是引起重癥肺炎的主要病原體。不動桿菌屬中的鮑曼不動桿菌、未命名基因種3和13TU表型相近，臨床僅統(tǒng)稱為醋酸鈣-鮑曼不動桿菌復(fù)合體(Acinetobactercalcoaceticus-Acinetobacterbaumanniicomplex)，但準(zhǔn)確鑒定出鮑曼不動桿菌對監(jiān)控醫(yī)院內(nèi)感染的發(fā)生有重要意義[1]。碳青霉烯類抗菌藥物是目前治療鮑曼不動桿菌的首選藥物，但近年來該菌的耐藥性上升迅速，給鮑曼不動桿菌感染的治療帶來了巨大挑戰(zhàn)。鮑曼不動桿菌耐藥機(jī)制復(fù)雜，其中產(chǎn)生抗菌藥物滅活酶和主動外排泵的激活是近年來研究的熱點(diǎn)[2]。本研究分析江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科重癥肺炎患者分離的鮑曼不動桿菌攜帶各種β-內(nèi)酰胺酶基因和主動外排泵基因的情況，旨在了解耐藥菌的耐藥機(jī)制，以指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 材料與方法

1.1菌株收集 研究對象為2017年9月至2018年12月間江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科確診重癥肺炎患者。納入標(biāo)準(zhǔn)為美國感染疾病協(xié)會/美國胸科協(xié)會(IDSA/ATS)中重癥肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，包括2項(xiàng)主要標(biāo)準(zhǔn)和9項(xiàng)次要標(biāo)準(zhǔn)。主要標(biāo)準(zhǔn)：(1)需要有創(chuàng)機(jī)械通氣；(2)感染性休克需要血管收縮劑治療。次要標(biāo)準(zhǔn)：(1)呼吸頻率≥30次/分；(2)氧合指數(shù)≤250；(3)多肺葉浸潤；(4)低體溫(T<36 ℃)；(5)白細(xì)胞減少(WBC<4.0×109/L)；(6)血小板減少(血小板<100×109/L)；(7)低血壓，需要強(qiáng)力的液體復(fù)蘇；(8)意識障礙/定向障礙；(9)氮質(zhì)血癥(≥20 mg/dL)。符合1項(xiàng)主要標(biāo)準(zhǔn)或3項(xiàng)以上次要標(biāo)準(zhǔn)者納入。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并自身免疫性疾病；(2)合并嚴(yán)重心、肝和腎臟器疾病；(3)合并血液系統(tǒng)疾病和惡性腫瘤；(4)無法留取合格痰標(biāo)本者。所有研究對象均已簽署知情同意書。用一次性無菌吸痰管經(jīng)氣管插管或氣管切開處收集合格痰標(biāo)本，同一患者相同部位多次分離菌株不重復(fù)記入。共收集醋酸鈣-鮑曼不動桿菌復(fù)合體160株，所有菌株均經(jīng)VITEK 2 Compact全自動微生物鑒定系統(tǒng)鑒定為醋酸鈣-鮑曼不動桿菌復(fù)合體。其中男性101例，女性59例，年齡35～80歲。所有菌種以15%脫脂乳保存液凍存于-80 ℃中。質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC 25922和銅綠假單胞菌ATCC 27853購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2主要儀器與試劑 細(xì)菌培養(yǎng)箱(美國Thermo Fisher公司)；Vitek 2 Compact全自動細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)及配套板卡(法國生物梅里埃公司)；梯度PCR儀(美國ABI公司)。……