RSSs的組成和特征對(duì)體細(xì)胞V(D)J基因重排效率的影響①

姚新生 (遵義醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室，遵義 563003)

TCR/BCR的V(D) J基因體細(xì)胞重排主要依賴于重組激活基因(recombination-activating genes，RAG)酶等對(duì)重組信號(hào)序列(recombination signal sequences，RSSs)的識(shí)別、剪切和連接，RSSs由12 bp 或23 bp的非保守間隔子(spacer)、分離保守的7聚體(heptamer)和9聚體(nonamer)組成，分別稱為12RSSs(7-12-9)和23RSSs(9-23-7)，體內(nèi)V(D) J重組一般只發(fā)生在12RSSs～23RSSs間，即重組“12/23規(guī)則”[1-3]。

RSSs中，heptamer的保守或共識(shí)序列為CACAGTG,noname的保守或共識(shí)序列為ACAAA-AACC,V(D)J重組分為兩個(gè)階段,第一階段為DNA的識(shí)別和剪切，第二階段為DNA的分裂和結(jié)合,鈍的信號(hào)末端形成閉環(huán)鏈接，編碼末端按共價(jià)密封連接形成重排產(chǎn)物[3-5]。

RSSs側(cè)翼的基因片段是等效參與重組的，但多項(xiàng)研究證實(shí)，抗原選擇前的V(D)J重組并非隨機(jī)重排，保守的heptamer、noname序列、規(guī)則的12 bp/23 bp 間隔子長度、RSSs的近端/遠(yuǎn)端重組基因間距等與V(D)J取用頻率密切相關(guān)，形成V(D)J表達(dá)頻率差異的TCR/BCR組庫[6-11]。T、B細(xì)胞發(fā)展抗原與配體自我耐受選擇和克隆增生應(yīng)答導(dǎo)致V(D)J取用頻率進(jìn)一步改變[12-14]。

因體內(nèi)RSSs對(duì)TCR/BCR初始重排中V(D)J 取用影響極為復(fù)雜，現(xiàn)有研究多數(shù)集中于外周細(xì)胞系，體內(nèi)的影響效果和機(jī)制尚未闡明。外周TCR/BCR組庫V(D)J取用頻率和抗原的關(guān)系、初始重組導(dǎo)致V(D)J取用差異，導(dǎo)致外周TCR/BCR組庫的機(jī)制與意義研究結(jié)論存在偏差。

1 RSSs簡(jiǎn)介

TCR/BCR的多樣性源于體胚系V(D)J基因在體細(xì)胞水平上的重排，重排的發(fā)生由2個(gè)重組基因上非編碼“特殊DNA序列”引導(dǎo)，此“引導(dǎo)序列”在脊椎動(dòng)物的進(jìn)化過程中高度保守，被命名為RSSs，每個(gè)RSSs由12 bp或23 bp的非保守間隔子分離保守的7聚體和9聚體組成，12RSSs組成為：heptamer-12 bp spacer-nonamer(7-12-9),23RSSs組成為：nonamer-23 bp spacer-heptamer(9-23-7)。

TCR/BCR重組基因片段中，各V基因片段的3′端和各J基因的5′端各進(jìn)化出1個(gè)RSSs，各D基……