CD276對乳腺癌細胞遷移、侵襲的影響及其初步機制研究

關愛華 蔡 勇 孫 瑜 李萬鋒

(吉林省腫瘤醫院乳腺外科，長春 130012)

乳腺癌在女性惡性腫瘤發病率中位居首位，是嚴重威脅女性健康的惡性腫瘤。乳腺癌的發生和發展是一個多基因參與、多步驟演進的復雜過程，目前其發病機制尚未完全闡明[1]。腫瘤轉移是腫瘤致死的主要原因，因此，預防和抑制腫瘤轉移至關重要。

免疫檢測點分子是腫瘤免疫學研究的熱點之一。CD276屬于免疫檢查點分子的B7超家族，其在大多數正常組織中低表達，但在各種癌組織，包括乳腺癌、膀胱癌、宮頸癌、結腸癌等則異常高表達[2,3]，且其高表達與乳腺癌、宮頸癌、腎癌等有較差的預后相關[4-6]。但CD276對腫瘤細胞生物學特性所產生的影響及其確切機制尚不十分清楚。鑒于CD276的表達與腫瘤分級及遠端轉移相關，推測CD276可能與腫瘤細胞侵襲能力相關。

本文在乳腺上皮細胞系MCF-10A中過表達CD276，在乳腺癌細胞系T-47D中敲低CD276的表達，研究過表達或敲低CD276的表達對細胞遷移和侵襲的影響及其初步的作用機制，從而為闡明CD276的生物學作用奠定基礎，以期為乳腺癌的治療提供新的靶點。

1 材料與方法

1.1材料 MCF-10A和T-47D細胞系購自上海細胞研究所細胞庫，并由本院中心實驗室傳代培養。CD276真核表達載體pcDNA3-CD276和pRNAT-CD276shRNA(CD276shRNA sequence:5′-GTGCTGGAGAAAGATCAAA-3′)由東北師范大學藥物基因和蛋白篩選國家工程實驗室饋贈。Snail、Slug和E-cadherin抗體均購自Santa Cruz Biotechnology公司，抗CD276抗體購自RB公司,抗GAPDH抗體購自上海康成生物有限公司，HRP標記的第二抗體購自北京鼎國昌盛生物技術有限公司。PVDF膜購于羅氏公司。預染蛋白分子量標準購于碧云天生物技術研究所。……