長鏈非編碼RNA NEAT1對非小細胞肺癌增殖和凋亡的影響及其機制①

李寶輝 馬 輝 侯明明 李新萌 陳 虎 孔祥軍

(滄州市中心醫院中心實驗室，滄州 061001)

肺癌是世界上癌癥相關死亡的最常見原因之一，非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)作為肺癌的主要亞型占所有病例的70%～80%[1]。雖然肺癌的診斷和治療取得了很大進展，但總體生存率仍然不高，高死亡率可能與早期腫瘤轉移和復發有關[2]。因此，迫切需要更好地了解NSCLC進展中涉及的分子機制，并為患者找到更有效的治療方法。近年來研究發現，許多長鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)在生物過程中發揮重要作用，包括細胞增殖，轉移和分化[3-5]。許多失調的lncRNA參與NSCLC的各種生物學活性，例如，lncRNA PTV1、MALAT-1和HOTAIR[6-8]。然而，很少有研究關注富含核的豐富轉錄物1(Nuclear enriched abundant transcript 1，NEAT1)在NSCLC中的作用。本研究探討了NEAT1在NSCLC中的潛在功能，并初步分析了其相關機制，Wnt/β-catenin信號通路在調節腫瘤發展的多個方面(包括NSCLC)中起重要作用，NEAT1是一種新型的lncRNA，在許多癌癥中起著重要的調節作用，因此我們進一步探討了NEAT1是否可能參與Wnt/β-catenin信號通路。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑及儀器 非小細胞肺癌細胞系A549、SPCA1和正常細胞系BESA-2B均購自中國科學院生物化學與細胞生物學研究所，Transwell、SOX9及GAPDH一抗購自美國BD公司，RPMI1640培養基購自美國Gibco公司，Trizol和細胞轉染試劑購自美國Invitrogen公司，一步法RT-PCR試劑盒購自大連寶生物工程有限公司，熒光檢測試劑盒購自美國Promega公司。實驗所用PCR儀為ABI 7500，酶標儀為Thermo FC。

1.1.2組織標本 收集自2015年1月至2016年12月來我院就診經病理學診斷確診為NSCLC的患者91例，手術前未進行局部或全身治療，獲取其NSCLC組織和相鄰非腫瘤組織，液氮中快速冷凍后于-80℃超低溫冰箱中保存。……