Notch信號(hào)通路參與龍生蛭膠囊的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用

秦 詠 王 瑩

(山東省胸科醫(yī)院藥劑科，濟(jì)南 250013)

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是心腦血管疾病的重要病理基礎(chǔ)，是一種導(dǎo)致斑塊發(fā)展和冠狀動(dòng)脈進(jìn)行性狹窄的炎癥性疾病[1]。當(dāng)人體內(nèi)脂質(zhì)代謝發(fā)生紊亂，引起局部炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致AS發(fā)生[2]。已有研究發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)通路可調(diào)控血管新生，且阻斷Notch配體可減輕代謝紊亂和動(dòng)脈粥樣硬化[3,4]。龍生蛭膠囊是由黃芪、水蛭、川芎等12味藥組成的復(fù)合制劑，具有補(bǔ)氣活血、化瘀通絡(luò)的功效，在臨床上聯(lián)合其他藥物對(duì)腦梗及氣虛血瘀型腦梗死患者有較好的治療效果[5,6]。龍生蛭膠囊可降低血脂，抑制炎癥反應(yīng)，但其作用的具體機(jī)制尚未闡述清楚[5,7]。因此，本次研究通過高脂飼料喂養(yǎng)構(gòu)建AS大鼠模型，探討龍生蛭膠囊是否通過調(diào)節(jié)Notch信號(hào)通路對(duì)AS大鼠產(chǎn)生治療作用。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物 無特定病原體(Specific pathogen Free,SPF)級(jí)SD大鼠60只，體質(zhì)量(180±20)g，購自長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(湘)2014-0010。

1.1.2主要試劑 總膽固醇(Total cholesterol，TC)、三酰甘油(Triglyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)及一氧化氮(NO)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所；TNF-α和IL-6 ELISA試劑盒均購自武漢華美生物有限公司；CD31抗體購自BD公司；兔抗活性Notch胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(Notch intracellular domain，NICD)多克隆抗體和兔抗Hes1多克隆抗體均購自Abcam公司；GAPDH購自Sigma公司；PVDF膜和化學(xué)發(fā)光試劑均購自Millipore公司。

1.2方法

1.2.1動(dòng)物分組及模型構(gòu)建[8]SD大鼠60只隨機(jī)分為6組：正常組(N)、模型組(AS)、龍生蛭膠囊低劑量組(LSZ-LD)、龍生蛭膠囊中劑量組(LSZ-MD)、龍生蛭膠囊高劑量組(LSZ-HD)和辛伐他汀組(Simvastatin)，每組10只。除正常組大鼠給予普通飼料喂養(yǎng)外，其他五組大鼠均給予高脂飼料喂養(yǎng)和一次性腹腔注射維生素D3(70萬U/kg)。……