miR-137對IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)及自噬的作用及機制研究①

丁 童 贠 霄 周彥鵬 楊衛(wèi)強 馮立平

(新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院創(chuàng)傷外科，新鄉(xiāng) 453000)

骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)是一種關(guān)節(jié)軟骨和骨連接處損傷的關(guān)節(jié)疾病,最主要的癥狀為關(guān)節(jié)疼痛和僵硬，并伴有關(guān)節(jié)腫痛，活動受限，四肢麻木等[1]。骨關(guān)節(jié)炎為最常見的關(guān)節(jié)疾病，影響著大約2.37億人(約占總?cè)丝诘?.3%)[2]。在超過60歲的老年人口中，大約有10%的男性和18%的女性受到關(guān)節(jié)炎的折磨[1]。既往研究報道，miR-137在多種腫瘤中表達(dá)下降，并且可以作為腫瘤預(yù)后的診斷分子，如肺癌、結(jié)腸癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌等[3,4]。另一方面，miR-137還可以通過靶向MK2基因來抑制炎癥應(yīng)答和細(xì)胞凋亡來保護脊柱神經(jīng)損傷[5]。另外還有研究證明，在人類及小鼠的生長發(fā)育過程中，miR-137具有促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞分化的作用[6]，同時IL-1β還在OA的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，如IL-1β可以促進(jìn)滑膜細(xì)胞和關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞釋放中性蛋白酶和前列腺素E2，這些因子通過刺激關(guān)節(jié)細(xì)胞發(fā)生關(guān)節(jié)炎癥，而導(dǎo)致關(guān)節(jié)發(fā)生退行性關(guān)節(jié)炎[7]。但是針對OA發(fā)生發(fā)展涉及miR-137和IL-1β相關(guān)的信號機制研究結(jié)果鮮有報道，因此我們根據(jù)既往的研究結(jié)果，利用IL-1β誘導(dǎo)的大鼠軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)為研究體系，對軟骨細(xì)胞中可能對細(xì)胞命運產(chǎn)生影響的miR-137機制進(jìn)行深入探究，期望為軟骨細(xì)胞炎癥的治療提供新的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料 DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液、胎牛血清和胰酶均購自美國Gibco公司。轉(zhuǎn)染試劑盒Lipofecta-mine3000(貨號：L3000008)購自Thermo公司。IL-1β(貨號：ab119727)、BMP2(貨號：ab14933)、CollagenⅠ(貨號：ab34710)、Beclin-1(貨號：ab207612)、P62(貨號：ab56416)、LC3A/B(貨號：ab128025)、β-actin(貨號：ab124964)一抗購自美國abcam公司。HRP標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗購自美國Santa Cruz公司。……