賀 攀 趙肅清 楊慧怡 余林金 盧明磊 魏秀婷
(廣東工業大學生物醫藥學院,廣州 510006)
伴放線聚集桿菌(Aggregatibacteractinomycetemcomitans,Aa)是青少年局限型侵襲性牙周炎的主要致病菌[1]。嚴重的牙周炎可導致咀嚼受損、牙根暴露、牙齒松動、牙齒脫落等癥狀[2]。目前主流的治療方法是聯合使用基礎治療(如潔治、刮治、根面平整等)和抗生素[3],但濫用抗生素導致耐藥細菌株的出現已成為一個全球性問題[4,5]。亟需尋找新的治療方法。
卵黃抗體(Egg yolk antibody,IgY)是禽類血清中的主要免疫球蛋白,產蛋禽類經特異性抗原免疫后,所產生的特異性卵黃抗體可以從血液中轉移至卵黃中富集。卵黃抗體具有靶向性強、副作用低、無污染、無需采血、易于大量生產等優點,廣泛應用于多種病原微生物疾病的預防和治療[6]。在口腔方面,通過口服被動免疫途徑,抗具核梭桿菌和中間普氏菌的特異性卵黃抗體被用于治療牙周疾病[7,8],具有代替抗生素的潛力[9]。因此,本研究制備抗伴放線聚集桿菌卵黃抗體,研究其體外生物活性,為預防和治療牙周疾病提供理論依據。
1.1材料
1.1.1實驗菌株 伴放線聚集桿菌(ATCC 29523,GIM 1.393)購買于廣東省微生物菌種保存中心。
1.1.2實驗動物 選取6只20周齡的健康產蛋母雞,飼養于廣州太和良田良沙養雞廠。
1.1.3培養基 血平板瓊脂培養基,胰蛋白胨大豆肉湯培養基。
1.1.4主要試劑和儀器 弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑 (Sigma,美國);辣根過氧化物酶標記的兔抗雞二抗(EarthOx,美國);異硫氰酸熒光素標記的驢抗雞二抗 (上海生工生物工程有限公司);……