miR-503-5p靶向bFGF對人膀胱癌T24細胞侵襲和遷移的調節作用①

劉昌明 黃香塵 杜 斌

(雅安職業技術學院病理教研室，雅安625000)

膀胱癌是泌尿系統最常見的發生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤，其發病率居全球惡性腫瘤的第9位，并有逐年增長的趨勢[1]。而miR-503是一種在染色體Xq26.3位點與miRNA-424結合的基因內小RNA，其與乳腺癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和肺癌等多種癌癥的發生和發展相關[2]。但關于miR-503-5p的報道并不多，主要是抑制成骨分化和腫瘤細胞增殖[3-5]。并已有報道發現miR-503-5p通過干擾Rb/E2F信號通路來抑制膀胱癌細胞T24的增殖[4]，但miR-503-5p對膀胱癌細胞T24的侵襲和遷移的作用及機制并不清楚。堿性成纖維細胞生長因子(Basic Fibroblast Growth Factor ，bFGF)能夠促進腫瘤細胞的遷移，誘導腫瘤相關成纖維細胞分化，促進腫瘤的生長[6]。Horstmann等[7]發現bFGF的表達程度反映了腎癌的侵襲性，Li等[8]研究發現bFGF通過誘導調控Ets-1和uPA的表達增強體外卵巢癌細胞的侵襲能力，所以bFGF和腫瘤細胞的侵襲遷移具有一定關系。本文主要研究miR-503-5p對膀胱癌細胞T24侵襲和遷移的調節作用及機制，為后期膀胱癌的治療和診斷提供新的靶點。

1 材料與方法

1.1材料 人膀胱癌細胞T24購自上海雅吉生物科技有限公司；RPMI1640培養基和胎牛血清購自美國Gibco BRL公司；miR-503-5p mimic、pcDNA-bFGF質粒由上海生工生物工程有限公司合成。LipofectamineTM2000 轉染試劑盒購自美國ABI公司；Dual Luciferase報告基因試劑盒購自上海前塵生物科技有限公司；Transwell小室購自美國 Corning 公司；BCA試劑盒購自北京天根生化有限公司；鼠購自四川大學生物治療國家重點實驗室[許可證：SYXK(川)2016-178]。

1.2方法

1.2.1靶基因預測 運用在線基因預測軟件：TargetScan (http://www.targetscan.org)和miRanda(http://www.microna.org/microrna/home.do)預測miR-503-5p的靶基因。……