miR-369-3p靶向MMP14調節乳頭狀甲狀腺癌細胞侵襲、遷移和上皮間質轉化的作用①

王小清 王金蓮 林 帥 侯令密 謝少利 青 曉

(川北醫學院附屬醫院甲狀腺乳腺外科，南充637000)

乳頭狀甲狀腺癌(Papillary thyroid cancer,PTC)在所有甲狀腺腫瘤中最為常見，所占比例大約85%～90%[1]，該腫瘤疾病目前的主要治療方法是手術切除，具有較高的術后治愈率和生存率，然而對甲狀腺癌的手術治療會損害患者甲狀腺功能，導致鈣代謝紊亂、喉神經損傷等疾病發生[2]，嚴重影響了患者的生活質量。因此，尋找副作用低的可替代療法對于改善PTC患者治療后的生活質量具有重要意義。

基質金屬蛋白酶家族(Matrix metalloproteinase,MMP)在腫瘤細胞的侵襲和轉移中發揮著重要作用[3]。其中MMP14定位于質膜，參與了組織生長發育和血管生成等生理過程[4,5]，該酶可激活MMP2蛋白表達，從而提高腫瘤細胞的侵襲能力[6]。研究表明MMP14參與了多種腫瘤細胞的生長與擴散過程，證實了MMP14表達與甲狀腺癌的發生發展的相關性，因此，MMP14具有作為臨床上癌癥診斷檢測指標以及基因靶向治療位點的潛力[7-10]。

MicroRNA(miRNA)是一類長度約22 nt的小分子非編碼RNA，可通過與mRNA 3′UTR結合沉默目的基因，在癌癥中發揮著重要的調控作用[11]。miR-369-3p已被報道在PTC中可以抑制腫瘤細胞增殖[12]。通過生物信息學預測，MMP14很可能是miR-369-3p的作用靶點之一，本研究通過培養人乳頭狀甲狀腺癌B-CPAP細胞，并通過miR-369-3p mimic處理及構建MMP14過表達細胞株，初步探究了miR-369-3p在PTC細胞中與MMP14的相互作用及調控機制。

1 材料與方法

1.1主要試劑 RPMI1640細胞培養液和胎牛血清購自美國Gibco公司，Lipofectamine 2000轉染試劑盒購自Invitrogen公司，Trizol試劑、RIPA裂解液、BCA試劑盒、Ecl顯色液購自北京索……