573例女性不孕癥患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb檢測結(jié)果分析

王小花，俞巖，葉文嬌，王茹，鐘桂蘭

(海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心 海南省婦幼保健院，海口570206)

不孕癥是一種特殊的生殖健康缺陷，其醫(yī)學(xué)定義為在結(jié)婚至少1年內(nèi)未采取任何避孕措施，且性生活正常(1周≥2次)而未懷孕的情況[1]。根據(jù)曾經(jīng)是否有受孕的情況，不孕癥主要分為原發(fā)性不孕(從未受過孕)和繼發(fā)性不孕(曾經(jīng)受過孕[2])。據(jù)WHO調(diào)查結(jié)果顯示，我國有10%～15%的已婚夫婦存在不孕不育，其中女性不孕占25%～36%[3]。排卵障礙、輸卵管堵塞、子宮內(nèi)膜異常以及宮頸狹窄等是導(dǎo)致女性不孕的常見因素[4]。此外，近幾年生殖免疫導(dǎo)致女性不孕的情況越來越多，逐漸受到臨床專家的關(guān)注[5]。抗精子抗體(AsAb)、抗子宮內(nèi)膜抗體(AEmAb)、抗心磷脂抗體(ACPAb)、抗透明帶抗體(AZpAb)、抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)及抗滋養(yǎng)層抗體(ATAb)是與不孕有關(guān)的器官特異性自身抗體[6]。所以，本研究擬通過分析573例女性不孕患者血清中這6種抗生殖免疫抗體檢測結(jié)果，了解抗生殖免疫抗體的檢測能否為女性不孕的臨床診斷及治療提供幫助。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 經(jīng)海南省婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)后，選取2017年1月～2019年2月在本源就診的女性不孕癥患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①原發(fā)或繼發(fā)不孕，不孕期>2年；②符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中不孕的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③夫妻性生活正常，丈夫精液正常；④患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有肝腎功能障礙、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等；②近3個月內(nèi)有激素治療史。共收集女性不孕癥患者573例(不孕組)，年齡(29.75±8.15)歲，BMI(22.80±2.60)kg/m2，其中原發(fā)性不孕370例、繼發(fā)性不孕203例。同時選取有正常妊娠史婦女200例作為對照組，年齡(30.10±6.43)歲，BMI(22.97±2.43)kg/m2。兩組年齡、BMI具有可比性。

1.2 6種抗生殖免疫抗體檢測方法 在研究對象清早空腹時，分別抽取外周靜脈血4 mL；自然凝集后，以3 000 r/min離心15 min，分離上清液，于-60 ℃冰箱中凍存?zhèn)溆谩２捎瞄g接ELISA法檢測血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb，所用試劑盒均購于中美合資北京貝爾生物工程有限公司，操作過程嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行[7]。應(yīng)用雷杜RaytoRT-2100C酶標(biāo)分析儀(上海艾研生物科技有限公司)檢測6種抗體在波長450 nm時的吸光度(OD)值，凡樣品孔OD值﹥1即為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以百分率表示，組間比較行χ2檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不孕組和對照組6種血清抗生殖免疫抗體比較 不孕組血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽性率均高于對照組(P均<0.05)，見表1。

表1 不孕組和對照組6種血清抗生殖免疫抗體陽性率比較(%)

注：與對照組比較，*P<0.05。

2.2 不孕組不同年齡患者6種血清抗生殖免疫抗體比較 見表2。

表2 不孕組不同年齡患者6種血清抗生殖免疫抗體比較(%)

注：與年齡≥30歲者比較，P均﹥0.05。

2.3 不孕組原發(fā)性和繼發(fā)性患者6種血清抗生殖免疫抗體比較 見表3。

表3 不孕組原發(fā)性和繼發(fā)性患者6種血清抗生殖免疫抗體比較(%)

注：與繼發(fā)性不孕者比較，*P<0.05。

3 討論

對育齡婦女而言, 不孕癥是臨床常見的疾病。隨著生活節(jié)奏的加快以及人們生活方式的改變，女性不孕的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，不僅降低了女性的生活質(zhì)量，還影響了婚后家庭和睦[8]。據(jù)統(tǒng)計[9]，不明原因造成的不孕患者依然占10%～20%。有研究表明，患者自身生殖免疫情況與不明原因?qū)е碌牟辉邪Y之間存在密切聯(lián)系[10]。生殖免疫抗體可通過多種途徑干預(yù)正常的妊娠過程，如降低精子活性、阻礙精卵結(jié)合、阻礙受精卵著床、抑制胚胎發(fā)育等；在體內(nèi)逐漸增多的生殖免疫抗體不僅會造成不孕,還會導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局,對患者與胎兒的生命健康造成極大的威脅[11]。

AsAb是最常見的抗生殖免疫抗體，由于免疫耐受和女性生理屏障等因素，女性一般不產(chǎn)生AsAb。但如果性生活發(fā)生在女性生殖道黏膜破損時，精子抗原極易穿過破損的黏膜上皮屏障，刺激B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生AsAb[12]。AsAb可從多個途徑造成不孕和流產(chǎn)，如影響精子的運送、降低精子活性，抑制精子穿透宮頸黏液、放射冠和透明帶，阻礙精卵結(jié)合等[13]。AEmAb是一種自身抗體，通過與子宮內(nèi)膜中的抗原結(jié)合發(fā)生一系列免疫病理反應(yīng)。例如：激活補體系統(tǒng)來損傷子宮內(nèi)膜腺體功能，降低糖原的分泌等，從而使胚胎獲得營養(yǎng)不足，受精卵著床和胚囊發(fā)育受阻，最終造成不孕及早期流產(chǎn)[14,15]。hCG是一種由胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的、用來維持早期妊娠的糖蛋白激素。AhCGAb則干擾hCG對胎兒的生理保護(hù)，致使流產(chǎn)的發(fā)生[16]。AZpAb是女性體內(nèi)針對自身透明帶組織產(chǎn)生的抗體，可以阻礙精子穿過透明帶與卵子結(jié)合，從而影響受精和受精卵著床[17]。反復(fù)和習(xí)慣性流產(chǎn)的患者中ACPAb陽性率較高，可見ACPAb與流產(chǎn)密切相關(guān)，其損傷機制主要有激活血小板凝集系統(tǒng)促胎盤供血凝集、收縮血管、降低胎盤血流量等[18]。

本研究結(jié)果顯示，不孕組血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽性率均高于對照組，說明血清生殖免疫抗體升高是導(dǎo)致女性不孕的因素之一；不孕組年齡<30歲與≥30歲患者血清AsAb、AEmAb、AZpAb、AhCGAb、ACPAb、ATAb陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示生殖免疫抗體作為檢測女性不孕指標(biāo)時不受年齡的影響。繼發(fā)性不孕患者血清AEmAb、AhCGAb、ACPAb陽性率高于原發(fā)性不孕患者，血清AsAb、AZpAb、ATAb陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這表明在繼發(fā)性不孕進(jìn)展中，AEmAb、AhCGAb和ACPAb可能發(fā)揮著較大的作用；其原因可能是子宮內(nèi)膜受損能促進(jìn)AEmAb、AhCGAb 的產(chǎn)生，而造成子宮內(nèi)膜受損最常見的原因就是患者流產(chǎn)，所以繼發(fā)性不孕者體的AEmAb、AhCGAb陽性率高；而ACPAb陽性的孕婦在妊娠早期易反復(fù)流產(chǎn)，后期易導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡，所以繼發(fā)性不孕患者ACPAb陽性檢出率高于原發(fā)性不孕患者。由此可見，生殖免疫抗體在女性不孕的過程中有較高的陽性表達(dá)率，是影響生殖的重要免疫因素，且部分生殖免疫抗體對區(qū)別原發(fā)性和繼發(fā)性不孕癥也有一定的臨床價值。