蘆丁對(duì)人肺癌A549/DDP細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制

孔祥虎 李志欣 房麗君 焦建峰

(包頭市腫瘤醫(yī)院，包頭 014030)

肺癌是威脅我國(guó)居民健康的主要惡性腫瘤之一。我國(guó)每年新增肺癌患者約733.3萬(wàn)例，每年死于肺癌者達(dá)610.2萬(wàn)例，發(fā)病率和死亡率居惡性腫瘤譜第一位[1]。由于多數(shù)肺癌患者在確診時(shí)已為晚期，失去了手術(shù)治療的最佳時(shí)機(jī)，放療和化療成為主要的治療手段。盡管大多數(shù)肺癌患者對(duì)初始化療敏感，但化療耐藥性的產(chǎn)生是其療效下降的主要原因[2]。因此，如何逆轉(zhuǎn)化療耐藥性成為肺癌治療中亟待解決的問(wèn)題之一。蘆丁(Rutin,RT)，又名蕓香苷，是從蕓香葉中提取的一種黃酮苷類化合物。近年來(lái)研究顯示，可通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，以及逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性發(fā)揮抗腫瘤活性[3-7]。但目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)RT對(duì)肺癌順鉑(Cisplatin,DDP)耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用的報(bào)道。本研究擬通過(guò)分子生物學(xué)方法探究RT對(duì)人肺癌A549/DDP細(xì)胞順鉑耐藥性的影響及其分子機(jī)制。本研究有望為RT治療肺癌奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1材料 人肺癌細(xì)胞A549和順鉑耐藥株A549/DDP購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心；RT(100 mg/支，純度>97.1%)、IκB激酶(IκB kinase，IKK)抑制劑IKK16(10 mg/支，純度>99%)和DDP(50 mg/支，純度>99%)購(gòu)自美國(guó)Selleck公司；胎牛血清和RPMI-1640培養(yǎng)液購(gòu)自美國(guó)Hyclone公司；CCK-8試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物公司；Annexin V-FITC凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京凱基生物科技發(fā)展有限公司；Trizol試劑、RIPA裂解液和ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)(RT-PCR)試劑盒購(gòu)自大連寶生物公司；兔抗人IKKα、p-IKKα(Ser176)、p65、p-p65(Ser536)、多藥耐藥相關(guān)蛋白1(M……