人乳腺癌原代細胞組織塊培養方法的改良及其鑒定

王 敏，陸 祥，曾 峰，檀 軍，侯澤宇，陳 偉

(1.遵義醫科大學 組織胚胎學教研室，貴州 遵義 563099；2.貴州中醫藥大學第一附屬醫院，貴州 貴陽 550001；3.遵義醫科大學第一附屬醫院，貴州 遵義 563099)

乳腺癌是女性最為常見的惡性腫瘤，全球每年新發乳腺癌約167.1萬人，年死亡人數約52.2萬計[1]。乳腺癌是五大常見癌癥其中之一，也是全球女性最常見的癌癥死亡原因[2-4]。乳腺癌的發病機制尚不明確[5]，治療方法盡管不盡相同，但結果卻大同小異，依然呈現出高復發、高轉移和高死亡率等特點[6]。所以，建立體外的原代人乳腺癌細胞培養模型，用于人乳腺癌細胞分子生物學特征的研究，其重要性日顯突出。研究表明，原代培養人乳腺癌細胞的常見方法包括組織塊貼壁法、酶消化法和細胞培養法，與酶消化法和細胞培養法相比較，組織塊貼壁法實驗成本更低廉，細胞存活率更高[7]。但其在實際應用中也存在自身的缺點，如易污染，在剪碎組織培養細胞過程中，易造成組織損傷及失活，不利于細胞爬出，耗時較長等，尤其是成纖維細胞的生存和適應能力強，較早于腫瘤細胞從組織塊中爬出，進一步包繞組織塊導致腫瘤細胞難以爬出，少量癌細胞爬出后也很難完全去除成纖維細胞，純化方法不易操作而導致培養失敗[8]。針對這些問題，本研究采用改良的組織塊培養方法將乳腺癌組織塊中的癌細胞分離、純化、進行體外培養，期望在體外培養高純度的原代人乳腺癌細胞，為后續體外實驗研究奠定基礎。……