論高效液相色譜法在食品添加劑檢測中的應用

摘 要：當前隨著我國市場經濟社會的發展，食品生產公司規模不斷擴大，數量不斷增加，但是食品安全問題卻是一直存在的問題。因此，加強食品添加劑檢測對于保證食品安全是非常重要的。高效液相色譜法在檢測食品添加劑中發揮著重要的作用，它可以對食品中的添加劑是否超標進行嚴格的檢測。此次研究對高效液相色譜法的含義進行了闡述，且對該方法在食品添加劑檢測中的應用情況進行了闡述。

關鍵詞：高效液相色譜法;食品添加劑;檢測;應用

1 高效液相色譜法的原理與

特點

1.1 高效液相色譜法的原理

高效液相色譜法主要是指在高壓條件下溶質在固定相與流動相之間進行連續多次交換的一個過程，它主要是利用兩相間的分子大小、吸附力、親和力、分配系數達到不同溶質分離的目的。

1.2 高效液相色譜法的特點

從原理上進行分析，高效液相色譜法與經典液相色譜法之間并沒有本質的區別，但是它使用了高效微粒固定相、高靈敏度檢測器、新型高壓輸液泵，這就使得高效液相色譜法與常規方法相比更具有優勢。經過不斷的發展，當前的高效液相色譜法在操作自動化、檢測靈敏度、分離效能、分析速度方面均達到了較好的效果，且樣品適用范圍較廣，可選擇的流動相種類較多[1]。主要優勢為：通過高效微粒固定相可以使色譜分離效能顯著提高;使用新型的高壓輸液泵可以有效縮短分離時間;使用高靈敏度的檢測器可以顯著提高檢測靈敏度;高效液相色譜法的流動相、高柱效可以顯著改善分離過程，選擇性較高。

2 高效液相色譜儀

高效液相色譜儀主要由數據處理裝置、記錄儀、檢測器、色譜柱、進樣器、高壓輸液泵、貯液罐組成。基本的操作方法為：貯液罐中的流動相通過高壓泵進入系統，樣品溶液通過進樣器進入流動相，后被流動相載入色譜柱中，由于樣品溶液中各組分在兩相中的分配系數不同，在相對運動時會重復進行吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上會發生較大的區別，被分離為單個組分，在檢測時，樣品的濃度會從電信號傳輸到記錄儀上，數據要通過圖譜形式打印出來[2]。

2.1 貯液罐

貯液罐的材料應該選擇耐腐蝕的材料，主要為特種塑料聚醚醚酮（PEEK）、氟塑料、不銹鋼、玻璃。容積大約為0.5～2.0 L。制備型儀器、凝膠色譜儀的容積應該更大一點。貯液罐放置貯液罐放置位置要高于泵體，且要保持相對的輸液靜壓差。在使用期間要對貯液罐進行密封，以防溶劑蒸發引起流動相組成發生變化，還可以有效防止空氣中的二氧化碳、氧氣重新溶解到已脫氣的流動相中。

2.2 高壓輸液泵

高壓輸液泵主要分為恒流泵、恒壓泵。高壓輸液泵的要求主要為：①泵體材料要選擇耐化學腐蝕的。通常使用的材料為優質耐酸不銹鋼、普通耐酸不銹鋼;②可以在高壓下連續工作，耐壓一般為40～50 MPa/cm，在這個條件下可以連續工作8～24 h;③輸出流量穩定、重復性高;④輸出流量范圍寬。

2.3 色譜柱

色譜柱主要有固定相與柱管兩部分。柱壁材料主要為內壁光滑的聚合材料、銅、鋁、不銹鋼、玻璃等。色譜柱內徑為4～5 mm，長為5～30 cm，制備色譜柱內徑>25 mm，凝膠色譜柱內徑為3～12 mm。

2.4 檢測器

高效液相色譜法中檢測器的主要作用為監視經色譜柱分離后的組分濃度情況，描記的圖形主要是用于定量與定性分析，因此，檢測器要適應范圍廣、線性范圍寬、重復性好、靈敏度高，且要對溫度、流量變化變化不敏感。檢測器常用的為熒光檢測器（FD）、電導檢測器（ECD）、折光指數檢測器（RID）、紫外吸收檢測器（UVD）[3]。高效液相色譜中無通用檢測器，實際的應用要根據實際需求以及結合檢測器特點進行選擇與使用。

3 高效液相色譜法在食品添加劑檢測中的應用

食品添加劑主要是指為了改善食品的色香味、保鮮、防腐等在進行加工時加入的天然物質或者是人工合成物質。其主要有香精香料、抗氧化劑、天然或人工合成色素、甜味劑、防腐劑。天然食品添加劑對人體一般是沒有害處的，但是當前使用的添加劑一般是化學物質合成的，且具有一定的毒性，如果不限制使用劑量，會對人體健康產生很大的危害。因此，對食品中的添加劑進行控制與檢測，有利于保證食品安全與人民身心健康。食品添加劑分析一般使用的方法為HPICE、IPC、RHPLC。使用較多的檢測器為紫外-可見光檢測器（UVD），其次是折光示差檢測器（RID）、電導檢測器（CD）、UVD-RID、UVD-CD檢測器串聯等。色譜柱一般為C18柱，其次為陰離子色譜柱。另外，在進行檢測時要對食品添加劑組分高度重視[4]。

（1）甜味劑檢測。高效液相色譜法可以對食品中的甜菊苷、甘草苷、安賽蜜、甜蜜素、甜味素、糖精鈉等多種成分進行檢測，測定人工合成甜味劑的主要方法為陰離子交換色譜法、RHPLC-UVD法、離子對色譜法。因

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此，常用的檢測器主要為CD、UVD。色譜柱主要為-NH2柱、陰離子交換柱、C18柱。

（2）防腐劑檢測。高效液相色譜法檢測防腐劑時方法簡單，結果準確。脫氫乙酸、羥基苯甲酸乙酯（丙酯）、CA、BA均使用RHPLC法測定。CA、BA、甜蜜素檢測使用UVD-RID串聯技術。

（3）有機酸檢測。一般使用RID、UVD檢測器，RHPLC法（C18柱）主要檢測琥珀酸、延胡索酸、檸檬酸、醋酸、蘋果酸、酒石酸、乳酸等;或者使用PICE法，電導檢測器主要是對焦谷氨酸、乙酰丙酸、乙酸、乳酸、甲酸、琥珀酸、丙酮酸、啤酒中檸檬酸、酸奶、醬油、葡萄酒進行測定。

（4）色素檢測。對人工合成色素與天然色素檢測時使用HPLC法，簡單方便。應用C18柱分離、HPLC-UVD梯度洗脫系統可以對亮藍、赤蘚紅、日落黃、胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃、新紅進行測定。

（5）增白劑檢測。高效液相色譜法檢測過氧化苯甲酰的最小濃度為0.04 mg/kg。IC法主要是對各類食品中的H2SO3進行檢測。

（6）抗氧化劑檢測。使用RHPLC梯度洗脫方法對油脂中9種抗氧化劑進行檢測。最小濃度為2 mg/kg，或者使用高效液相色譜法對BHA、BHT、PG進行分離或者是檢測，該方法的回收率為84.0%、99.0%、95.0%。

（7）咖啡因檢測。應用C18反相體系UVD對飲料中的甜味素、咖啡因、糖精鈉、安賽蜜進行檢測，后三者的最小濃度大約為0.004 mg/mL，或者單獨對飲料中的咖啡因進行檢測。

4 結語

食品添加劑的種類較多，且發展速度較快，以往的檢測方法復雜，消耗的人力、物力較多。高效液相色譜法的發展與使用，提高了分離效率、分離速度、流動相的選擇范圍更加寬廣，靈敏度更高，不僅適用于分離，而且還適用于定量分析，在各種的化合物中，高效液相色譜法發揮了非常重要的作用。

參考文獻

[1]李卓，舒蕊華，張亞鋒，等.高效液相色譜法測定飲料中甜菊糖苷的不確定度評定[J].中國食品添加劑，2017

（3）：162-166.

[2]尹華.高效液相色譜-串聯質譜法測定飲料中6種食品添加劑[J].衛生研究，

2017（6）：116-119，125.

[3]郭蓉，王彩霞，胡佳薇，等.陜西省8類市售食品中防腐劑和甜味劑的檢測結果與分析[J].現代預防醫學，2017（7）：

52-54，85.

[4]吉生軍，星玉秀，王靜瑩，等.青稞酒中53種塑料添加劑檢測研究[J].食品研究與開發，2018（1）：106-112.

作者簡介：周旭峰（1984—），男，廣東陽江人，本科，檢驗員。研究方向：食品檢測。