姜黃素后處理對(duì)缺血再灌注腎損傷大鼠Notch2/Hes-1通路的影響*

（沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院，遼寧 沈陽 110024）

肢體缺血再灌注損傷（limb ischemia-reperfusion injury,LIRI）并非局限于肢體，還可以對(duì)遠(yuǎn)隔臟器造成損傷，特別是血運(yùn)豐富的腎臟，嚴(yán)重的LIRI甚至可以誘發(fā)急性腎功能不全[1-2]。姜黃素（Curcumine,Cur）是從姜科姜黃屬植物姜黃根莖中提取的一種酚性色素，是植物姜黃的主要活性成分之一，具有很強(qiáng)的抗炎及抗氧化作用，其對(duì)心、腦、腎及腸等臟器損傷有保護(hù)作用[3]；研究表明，LIRI是由多種信號(hào)通路和因子參與的復(fù)雜過程[4]。Notch信號(hào)通路廣泛存在于脊椎動(dòng)物和非脊椎動(dòng)物，在進(jìn)化上高度保守，人和大鼠都具有4種Notch受體[5]。文獻(xiàn)已經(jīng)證明，姜黃素預(yù)處理可減輕大鼠腎缺血再灌注損傷[6]，但是有關(guān)姜黃素后處理是否對(duì)肢體缺血再灌注腎損傷有保護(hù)作用，目前研究甚少。此次實(shí)驗(yàn)性研究旨在進(jìn)一步探討姜黃素后處理對(duì)大鼠肢體缺血再灌注腎損傷時(shí)Notch2/Hes-1通路的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

選成年雄性SD大鼠80只（由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)室中心提供），體重280～320 g，6～8月齡，姜黃素（批號(hào)：86M1611V，美國(guó)Sigma公司），γ-分泌酶抑制劑（DAPT）（美國(guó)Santa Cruz公司），堿性磷酸酶標(biāo)記二抗（美國(guó)Santa Cruz公司）。Trizol裂解液（美國(guó)Invitrogen公司），Hes-1-mRNA引物[寶生物工程（大連）有限公司]，兔抗大鼠Notch2受體多克隆抗體、兔抗大鼠β-actin多克隆抗體（美國(guó)Abeam公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

ES-1000 SPM 超聲血流儀（日本 Hayashi Denki公司），DYY-6B型電泳儀（北京六一儀表廠），PCR擴(kuò)增儀（德國(guó)Biometra公司），BX-41型顯微鏡（日本Olympus公司），Scion Image圖像分析系統(tǒng)（美國(guó)Apple公司）。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物分組與模型復(fù)制采用隨機(jī)數(shù)字表法將80只SD大鼠分為4組（n =20）：假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（I/R組）、姜黃素后處理組（I/R+Cur）、抑制劑組（I/R+DAPT組）。……