單寧酸對腎癌細胞生長的抑制作用及其機制①

王宏英 魏海峰 王衛芳 周曉晶 郭艷霞 米旭光 劉 磊 方艷秋

(長春中醫藥大學臨床醫學院，生物化學與分子生物學教研室，長春130021)

腎癌，又稱為腎細胞癌、腎腺癌，起源于泌尿小管上皮，腎癌約占成人惡性腫瘤的2%～3%，占成人腎臟惡性腫瘤的80%～90%。目前腎癌的治療主要依靠手術及化學藥物，化療藥物的作用主要是抑制癌細胞增殖，誘導癌細胞分化，或啟動癌細胞凋亡。研究表明，自然界中一些含有酚類化合物的植物具有抗癌的特性[1-3]，并不斷有新的具有抗癌功效的酚類化合物被發現[4]。祖國傳統中醫藥在腫瘤防治上具有獨特的優勢，我國藥典上收載的單寧酸具有多方面的藥理活性，具有顯著的抗炎、抗氧化、降糖、降脂、抗腫瘤等作用[5-7]。本實驗發現單寧酸(Tannic acid,TA)能顯著抑制人腎癌細胞OS-RC-2的生長。實驗結果為TA作為新藥應用提供了有價值的資料。

1 材料與方法

1.1材料 人腎癌細胞OS-RC-2購自中國科學院上海生命科學研究院，CCK-8試劑盒購自日本同仁，ROS 試劑盒、細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒均購自北京碧云天生物技術公司，2′,7′-二氯熒光黃雙乙酸鹽(2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)、TA購自Sigma公司，丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)及總超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所，8-羥基脫氧鳥苷(8-Oxo-deoxyguanosine,8-OHdG)及細胞間黏附因子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)ELISA檢測試劑盒購自美國RND公司，β-actin、Bcl-2、Bax、和Caspase-3抗體購自美國Santa Cruz公司。

1.2方法

1.2.1細胞培養 將腎癌細胞OS-RC-2置于含10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100 μg/ml鏈霉素的RPMI1640培養基中，在37℃、5%CO2及飽和濕度條件下常規培養，隔日用0.25%胰酶-0.02%EDTA消化傳代備用?！?br>