雷帕霉素對動脈粥樣硬化小鼠的治療作用及機理①

王 平 姚平波 張劍鋒

(南華大學附屬南華醫院重癥醫學科，衡陽421002)

動脈粥樣硬化是臨床常見的心腦血管疾病如冠心病、腦梗死和外周血管病變的主要病理原因，其發病的本質是脂質代謝障礙，特點表現為受累動脈病變從內膜開始，一般先有脂質和復合糖類積聚、出血及血栓形成，進而纖維組織增生及鈣質沉著，并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化，導致動脈壁增厚變硬、血管腔狹窄，且動脈血管內膜積聚大量黃色粥樣脂質[1,2]。動脈粥樣硬化的發病原因較為復雜，與高血壓、高血脂、糖尿病、肥胖和遺傳因素等均有密切關系[3,4]。自噬是真核細胞保守的生物學現象，在維持細胞脂質穩態中發揮著重要作用[5]。自噬在粥樣硬化中扮演雙刃劍的角色，起初的研究顯示在動脈粥樣硬化過程中自噬水平明顯增加，促進了動脈粥樣硬化的進展[6,7]。但是最近有報道顯示自噬也可以緩解動脈粥樣硬化的發生[8,9]。但是機制尚不完全清楚。本研究采用自噬激活劑雷帕霉素分析了其對動脈粥樣硬化的影響，旨在為臨床治療動脈粥樣硬化提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1材料 8周齡載脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-) C57BL/6J小鼠購自北京維通利華公司；DMEM培養基、胎牛血清和青鏈霉素均購自美國Gibico公司；LC3兔多克隆抗體均購自日本MBL公司;BODIPY493/503購自美國Thermo Fisher公司；TNF-α、IL-6和IL-1β ELISA試劑盒購自美國R&D公司；Ⅱ型膠原酶購自美國Sigma公司；高脂飼料購自南通特洛菲飼料科技有限公司；JEM-ARM200F 透射電子顯微鏡購自日本電子；ZEISS510激光共聚焦顯微鏡購自德國蔡司公司。……