吉非貝齊對心肌纖維化的作用及機制研究①

周凱章 鄭理玲 汪鐵軍

(湖北省腫瘤醫院，武漢430079)

心肌纖維化是細胞外基質在心肌間質內過度沉積，能夠導致心臟收縮和舒張功能障礙，同時也是多種心血管疾病發展為心力衰竭的共有病理過程[1]。目前的研究顯示他汀類藥物具有降脂、抗炎、減輕心肌肥厚以及調節內皮細胞功能的作用[2]。本研究采用壓力負荷誘導小鼠構建心肌纖維化模型，探討吉非貝齊是否能夠抑制慢性壓力負荷誘導的心肌纖維化，進一步探討吉非貝齊在心肌纖維化中的機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動物 8周齡C57BL/6雄性小鼠60只[北京華孚康生物科技實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(京)2017-0012]。小鼠適應環境1周選取體重滿足23.5～27.5g的雄性小鼠，TAC術構建心肌纖維化模型。

1.1.2藥物與試劑 一抗T-AKT (4691，1∶1 000)、phospho-AKT (P-AKT，4060，1∶1 000)、T-glycogen synthase kinase 3β (GSK3β，9315，1∶1 000)、P-GSK3β (9323P，1∶1 000)、T-P38 (9212P，1∶1 000)、P-P38 (4511P，1∶1 000)、T-ERK (4695，1∶1 000)、P-ERK (4370P，1∶1 000)均購于Cell Signaling Technology公司;熒光二抗IRDye?800CW購自LI-COR公司;α-SMA抗體購于博士德生物公司;天狼星紅(PSR)染色試劑盒由北京海德創業公司提供。

1.1.3儀器 170-3940半干轉印系統(美國Bio-Rad公司);ODY-2182雙通道熒光掃描儀(美國LI-COR公司)；CX22光學顯微鏡(日本Olympus公司)；LightCycler480熒光定量PCR儀(德國Roche公司)；VFA-23-BV小動物呼吸機(美國Kent Scientific公司)；Mylab30超聲儀(意大利Esaote公司)。

1.2方法

1.2.1模型建立 根據既往研究構建心肌纖維化模型[3]。具體步驟如下：麻醉后備皮，固定小鼠，碘伏和75%酒精消毒手術區域，沿第二、三肋間隙剪開皮膚后顯露胸腔，分離胸主動脈，其上方平行放置26G或27G去尖針頭，用7號手術絲線將針頭和主動脈弓一齊扎緊后將針頭移去，關胸后縫皮。假手術在分離出胸主動脈后只掛線不結扎，其余步驟同TAC組。術后四周行心臟超聲檢查，取材?！?br>