健宮散對產后子宮炎奶牛生殖激素的影響

喬彥杰，張保軍，梁小瑞，王丹陽，谷新利，劉賢俠

（石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832003）

隨著奶牛業的不斷發展，不孕癥防治引起更多重視，其中子宮炎是引起奶牛不孕癥的病癥之一。Tsousis等[1]報道，奶牛患子宮內膜炎會增加1.5 倍淘汰率；Goshen 等[2]報道，以色列奶牛患子宮內膜炎后其泌乳期產奶量平均降低300～500 kg，可見子宮炎嚴重影響奶牛的生產性能，易造成巨大經濟損失。激素是動物內分泌細胞合成的一類化學物質，通過傳遞信息來調節組織細胞，從而影響動物機體的生理活動。雌二醇（E2）能誘發母畜發情，使子宮頸松弛開張，促進滲出物排出，使腺體分泌增加，防止子宮感染[3]；崔世泉[4]報道，黃體生成素（LH）可以促進黃體形成并維持黃體分泌雌激素和孕激素；祝曉麗[5]報道，促卵泡生成素（FSH）與E2、LH 的協同作用可促進卵泡發育、成熟、排卵。

健宮散是由石河子大學動物科技學院中獸醫學研究室研制的超微粉散劑，采用活血化瘀、補血補氣的原則，可調節機體內環境，促進機體恢復。健宮散配方中有益母草、桃仁、川芎具有活血祛瘀、活血行氣作用[6-7]。本試驗旨在研究健宮散對子宮炎奶牛E2、FSH、LH 的影響，探討健宮散治療奶牛子宮炎的作用機理，以期為中藥防治奶牛子宮炎提供技術支撐，也為該藥的臨床應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 試驗于2017 年9 月—2018 年6 月在石河子西部牧業良繁中心奶牛場進行。選取18 頭年齡、胎次、體況評分差異不顯著的荷斯坦奶牛，通過50s 型Tringa Vet 獸用便攜式B 超儀（荷蘭Piemed ICAL 公司生產）檢查，分為患病組、治療組、正常組，每組各6頭。治療組平均年齡為5～6 歲，患病組平均年齡5～6 歲，正常組平均年齡為4～5 歲。正常組體況評分在2.8～3.8，其中2、3、5 胎各2 頭。患子宮炎奶牛12 頭，6 頭作為治療組，6 頭作為患病組，其中2 胎和3 胎各3 頭、4 胎和5 胎及6 胎各2 頭，體況評分在2.9～4.5。

治療組每日灌服中藥健宮散400 g/ 頭，患病組與正常組灌服生理鹽水400 g/頭。健宮散由益母草、當歸、川芎、五靈脂、桃仁、甘草等中藥組成。

1.2 試驗方法

1.2.1 采血投藥時間 治療組在每天08:00—11:00 灌服健宮散400 g 1 次，連續1 個療程（7 d）。治療組灌服健宮散前通過尾靜脈采血1 次（一次性采血管購自三門縣民生醫藥有限公司），用藥中期采血1 次（灌服中藥的第3 天），灌服健宮散結束后第1、4、7、11、15、20 天各采血1 次，每次10 mL/頭，共采血8 次。置于室溫析出血清，收集血清-80℃超低溫冰箱（美國賽默飛世爾科技公司生產）保存，待檢。正常組、患病組則每天灌服無菌生理鹽水400 g 1 次，灌藥時間與采血時間同治療組。

1.2.2 激素含量測定 采用雙抗夾心ELISA 法檢測血清E2、FSH 和LH 含量，檢測試劑盒均購自上海藍基生物科技有限公司。

1.3 統計分析 相關數據用SPSS 17.0 統計軟件中的One-Way ANNOVA 的運算模塊進行單因素方差分析，用Duncan's 法進行多重比較。結果以平均值± 標準差形式表示，以P＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

由表1 可知，用藥前正常組的E2水平與治療組、患病組差異顯著；用藥中、停藥后各時間點3 組之間E2水平差異顯著。停藥后1 d 患病組和正常組的FSH 水平差異不顯著。3 組停藥后4、7 d FSH 水平差異顯著；停藥后11 、15、20 d 治療組FSH 水平高于患病組（P＜0.05）。用藥前正常組LH 水平與治療組差異顯著，患病組與正常組、治療組差異不顯著；用藥中、停藥后1、4、7、11 d 3 組之間LH 水平差異顯著；停藥后15 d 治療組LH 水平高于正常組、患病組（P＜0.05）；停藥后20 d治療組LH 水平與患病組、正常組差異不顯著，患病組LH 水平與正常組差異顯著。

健宮散治療后，E2、FSH、LH 都顯著上升，E2出現2 個峰值，即在停藥后1 d 達到最高峰，峰值為1 438.33 pg/mL；停藥后7 d 達到第2 個高峰，峰值為1 288.93 pg/mL；FSH 在停藥后4 d 達到高峰，峰值為10.61 ng/mL；LH 在用藥中達到高峰，峰值為14.74 ng/mL。其中治療組E2、FSH、LH 的峰值顯著高于正常組、患病組，而LH 的峰值比正常組、患病組峰值提前。

3 討 論

3.1 健宮散治療奶牛產后子宮炎的治則 中獸醫認為，子宮內膜炎屬濕熱帶下。濕為長夏之氣，傷于濕者，帶下污穢，黏膩停滯；熱為陽盛所生，迫津液外滲，消灼陰液[8-9]。實際生產中由于奶牛圍產期營養不良、產犢努責過度消耗、產后護理不當，會導致機體元氣虧損、寒邪郁結、氣血凝滯而發病[10]。根據中獸醫辨證論治的理論，應理氣化瘀、清熱祛濕。中藥復方健宮散采用活血化瘀、補血補氣的原則，方中益母草、桃仁、川芎可活血祛瘀、活血行氣，五靈脂可疏通血脈、散瘀止痛，當歸能補血養血、活血止痛，甘草能補脾益氣、清熱解毒[6-7]。因此，健宮散可調節機體內環境，促進機體恢復，對奶牛子宮炎具有明顯治療效果。

3.2 健宮散治療奶牛產后子宮炎的激素變化

3.2.1 中藥復方治療前后E2的變化 E2是生理活性最強的一種雌激素，可促進子宮平滑肌收縮，增加子宮血液循環和陰道內黏液的分泌，從而抵御外界細菌污染，提高子宮的免疫能力[3]。劉相洋[11]報道，奶牛E2水平在整個發情周期有2 次分泌高峰且伴大卵泡出現，分別在發情的第4 天和第12 天。高樹等[12]報道，在奶牛的正常發情周期中E2有3～4次分泌高峰，到發情周期的后期E2分泌開始升高，接近排卵時達到峰值。魏學良[13]報道，奶牛產后5 周E2水平出現最高峰，為51.2 pg/mL；胡路鋒[14]研究表明，奶牛子宮炎組E2水平在產后35 d 達到高峰660.49 pg/mL，而正常組E2水平在產后9 d 達到高峰645.11 pg/mL。本試驗表明，患病組、正常組與治療組E2水平高峰均出現在停藥后1、7 d，且峰值顯著高于前人[13-14]報道的水平，可能原因：①與直腸、B 超檢查密集有關。通過直腸按摩奶牛內部生殖器官，能夠改善局部血液循環與新陳代謝，增強有關激素的分泌，使生殖器官趨于正常活動，達到發情受孕的效果[15]；②營養情況、季節、胎次的差異[16]。有研究表明，胎衣不下是造成奶牛子宮炎的因素之一[17]，胎衣不下的奶牛血清中和胎盤中E2含量均低于胎衣正常排出的牛[18-19]。本試驗表明，正常組E2水平顯著高于患病組，與朱永剛等[18]、牟瑞營[19]研究結果一致，可能與部分奶牛存在胎衣不下有關。本試驗中，治療組用藥前的E2水顯著低于正常組，停藥后E2水平顯著高于患病組、正常組，表明中藥復方健宮散具有升高子宮炎奶牛血液中E2含量的作用，這可能與健宮散方中含有益母草、甘草和當歸等成分有關，通過藥物互相作用，調控E2合成與分泌，從而達到免疫力增強的效果。王若光等[20]報道，益母草具有雌激素樣作用，通過影響內源性雌激素合成及代謝過程，促進子宮恢復；陳蕙芳[21]報道，甘草兼有抗雌激素和雌激素活性功能，能影響雌激素代謝。體外甘草根提取物可促進E2與雌激素受體結合，在雌激素應答細胞中誘導轉錄活性，增強E2誘導的轉錄活性。鄧毅等[22]研究發現，當歸能顯著提高大鼠血清E2濃度。

表1 中藥復方治療奶牛產后子宮炎對E2、FSH、LH 影響

3.2.2 中藥復方治療前后FSH 的變化 FSH 是垂體分泌的一種糖蛋白類激素，可調節性腺激素的合成和分泌，促進卵泡發育和排卵[23-24]。姚路連[25]研究了奶牛圍產期血清FSH 水平的變化，發現在產后25 d FSH 水平達到峰值，為2.166 mIU/mL；高樹等[12]研究了奶牛子宮復舊期間FSH 動態變化，發現FSH 在產后15 d 左右出現峰值，為7.74 mIU/mL；李桂芝等[26]研究發現在奶牛發情周期中FSH 水平出現2 個波峰，分別在第10～13 天（20.2 ng/mL）和第19～20 天（30.2 ng/mL）；魏學良[13]研究發現FSH 在產后2～3 周處于較高水平；胡路鋒[14]研究發現正常組奶牛FSH 濃度在產后第21 天達到峰值，為1.52 ng/mL，而子宮炎組奶牛FSH 濃度在產后第15 天降至最低，而后緩慢升高。本試驗中患病組、治療組與正常組FSH 均呈現先上升后下降的趨勢，FSH 水平均于停藥后4 d 出現峰值，與魏學良[13]、胡路鋒[14]報道一致。胡路鋒[14]研究發現，產后13～25 d 正常組的FSH 濃度高于子宮炎組，與本試驗結果一致，可能與健宮散中藥有效成分黃酮有關。李炳奇等[27]研究發現黃酮能顯著提高FSH 水平，增強垂體的內分泌功能，促進促性腺激素的合成和釋放，利于卵泡的發育和卵巢的排卵。歐陽富龍等[28]研究發現復方中草藥添加劑能提高圍產期奶牛血清FSH、LH 水平。陳楊超等[29]研究發現益母草能顯著促進FSH 分泌。

3.2.3 中藥復方治療前后LH 的變化 LH 是受下丘腦激素GnRH 調節，協同FSH 促進卵泡成熟并排卵的一種糖蛋白類激素[24]。魏學良[13]研究發現奶牛LH 水平在產后第3 周上升。高樹等[12]研究奶牛子宮復舊期間LH動態變化規律，發現LH 從產后第21 天開始上升，到第24 天達峰值。姚路連[25]發現奶牛圍產期血清LH 含量在整體上呈現逐漸下降的變化趨勢，奶牛血清LH 含量從產前45 d 至產后10 d 緩慢下降，到產后20 d 急劇下降到0.108 mIU/mL，之后出現波動的變化。李桂芝等[26]對奶牛發情周期中生殖激素濃度與卵泡發育進行對比分析，發現LH 水平出現2 個波峰，波峰分別在發情周期中第1～2 天和第12～13 天。本試驗表明，用藥前治療組與正常組LH 水平差異顯著，正常組與患病組的LH 水平在停藥后1 d 達到高峰，與前人[12-13]研究結果一致；而治療組LH 水平在用藥中達到高峰，峰值為14.74 ng/mL，且治療組LH 水平顯著高于患病組；用藥后治療組與正常組差異不顯著。可能原因是健宮散作用于下丘腦-垂體-卵巢軸，促進FSH 和LH 的分泌，促進卵泡的成熟和排卵，使得卵巢分泌的E2與孕激素協同，發動下丘腦和垂體引起LH 釋放觸發排卵。

4 結 論

本試驗中，中藥復方健宮散可以促進性激素分泌，調節性激素代謝，提高E2、FSH 和LH 水平，因此對預防和治療奶牛子宮炎起到一定的作用。