PKA干預(yù)淫羊藿苷治療實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎對中樞神經(jīng)CREB表達(dá)的影響*

危智盛，張鳳，吳建良，黃葉青，刁勝朋，洪銘范

（廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，廣東 廣州 510080）

多發(fā)性硬化（multiple sclerosis,MS）是一種以中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)炎癥性脫髓鞘為主要病理變化的自身免疫性疾病。目前，針對該病仍缺乏有效的治療方法，對于急性或復(fù)發(fā)加重的治療，較公認(rèn)的觀點(diǎn)仍是以大劑量糖皮質(zhì)激素（Glucocorticoid,GC）沖擊治療為主[1]。然而，大劑量GC 可導(dǎo)致某些嚴(yán)重的副作用，如消化道出血、高血糖、骨質(zhì)疏松等。因此，研究人員嘗試開發(fā)某些新的具有治療潛力的分子或藥物，以求減少GC 使用劑量甚至替代GC。

本研究前期初步發(fā)現(xiàn)，具有植物雌激素活性的中藥單體淫羊藿苷（Icariin,ICA）對MS 的動物模型實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）有治療作用。ICA 主要通過雌激素受體β發(fā)揮雌激素效應(yīng)，從而改善EAE病情[2]。ICA 還可通過調(diào)節(jié)HPA 軸、抗細(xì)胞凋亡等途徑與甲潑尼龍達(dá)到協(xié)同治療EAE 的作用[3]，表明ICA 具有減少GC使用劑量的潛力，并具有良好的治療MS的前景。然而，ICA 的具體作用機(jī)制仍不十分清楚。為此本文在前期研究的基礎(chǔ)上，以信號通路的終止與交匯點(diǎn)環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP-response element binding protein,CREB）作為切入點(diǎn)，進(jìn)一步深入探討ICA 的作用機(jī)制，以期明確并驗(yàn)證ICA 對這一關(guān)鍵靶點(diǎn)的作用及機(jī)制，為開發(fā)新的治療MS 藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物與試劑

C57BL/6 小鼠，無特定病原體（specific pathogen free,SPF）級，雌性，6～8 周齡，體重15～20 g，購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心（許可證號：SCXK 粵2013-0002）。MOG35-55（2568）購自美國Tocris Bioscience 公司，ICA（I1286）及H89（B1427）購自美國Sigma-Aldrich公司，BCA 蛋白濃度定量分析試劑盒（NCI3225CH）購自美國Thermo 公司，GAPDH 小鼠……