血清GPC3檢測對原發性肝癌診斷價值

郭浚 曹玉剛

[摘要]目的 探討血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在原發性肝癌中的診斷價值。方法 選取我院收治的原發性肝癌病人72例，以肝硬化病人70例和健康志愿者70例作為對照，檢測各組血清GPC3水平。結果 原發性肝癌組血清GPC3水平明顯高于肝硬化組和健康對照組，肝硬化組血清GPC3水平明顯高于對照組（F=105.647，P<0.05）;腫瘤長徑>5 cm病人血清GPC3水平明顯高于腫瘤≤5 cm者（t=-2.771，P<0.05）;中低分化病人血清GPC3水平明顯高于高分化者（t=-2.276，P<0.05）。血清GPC3水平診斷原發性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截斷值為200 ng/L時，其原發性肝癌診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。結論 血清GPC3可用于原發性肝癌的診斷。

[關鍵詞]磷脂酰肌醇蛋白聚糖類;肝腫瘤;血清;診斷

[中圖分類號]R735.7

[文獻標志碼]A

[文章編號] 2096-5532（2019）05-0611-03

doi：10.11712/jms201905026

[開放科學（資源服務）標識碼（OSID）]

流行病學研究顯示，原發性肝癌的發病率和病死率均顯著上升[1-2]。疾病的早期診斷對于改善肝癌病人的臨床結局尤為重要。血清標志物檢測在惡性腫瘤早期篩查中的價值已獲共識。近年研究顯示，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）能夠影響癌細胞間連接蛋白的合成，降低癌細胞間的黏附能力，為癌細胞的轉移提供前提[3-4]，在促進癌細胞的增殖等方面發揮作用[5-6]。有研究認為，高表達的GPC3是促進肝癌病情進展的重要因素，但尚未見其對肝癌診斷學價值的分析。本研究通過對原發性肝癌病人血清GPC3水進行檢測，探討其與肝癌臨床病理特征的關系及其在原發性肝癌診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性研究方法，選取2016年2月—2017年5月在我院治療的原發性肝癌（C組）病人72例，納入標準：①均經病理組織學診斷;②研究前未進行放療、化療等治療;③臨床資料保存完整。排除標準：①臨床資料不完整;②合并有其他原發性惡性腫瘤者。同時選取肝硬化（B組）病人70例、健康志愿者（A組）70例作為對照。3組受試者性別、年齡等

一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

1.2 血清GPC3檢測方法

采集各組受試者肘部靜脈血3 mL，加入抗凝劑2 mL，1 000 r/min離心5 min，采用生物酶聯免疫吸附試驗方法檢測血清GPC3水平。GPC3檢測試劑盒購自羅氏生物檢測應用公司，配套試劑及儀器購自南京伯斯金生物科技有限公司。

1.3 統計學處理

采用SPSS 19.0軟件進行統計學分析。計量資料結果采用[AKx-D]±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗;兩組間比較采用t檢驗。計數資料比較使用χ2檢驗;診斷價值采用ROC曲線進行分析。以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清GPC3水平比較

原發性肝癌組、肝硬化組、對照組血清GPC3水平分別為（189.06±48.22）、（70.41±20.03）、（5.01±1.03）ng/L，原發性肝癌組明顯高于肝硬化組和對照組，肝硬化組明顯高于對照組，差異有顯著性（F=105.647，P<0.05）。

2.2 血清GPC3水平與原發性肝癌臨床病理特征關系

血清GPC3水平與原發性肝癌腫瘤大小、分化程度有關（t=-2.771、-2.276，P<0.05），與病人年齡、性別、TNM分期、HBsAg陽性、包膜、微血管侵犯和淋巴結轉移無關（P>0.05）。見表2。

2.3 血清GPC3水平診斷原發性肝癌的價值

血清GPC3水平診斷原發性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截斷值為200 ng/L時，其診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。見圖1。

3 討論

原發性肝癌容易早期發生淋巴結或者血行轉移，病情進展較為隱匿。長期臨床隨訪研究發現，中晚期肝癌占到了肝癌發病人群的25%以上，多數原發性肝癌臨床確診時已處于疾病的中晚期，失去了手術機會[7]。現階段臨床上肝癌的總體診斷水平仍然較低，一項匯集了115例病人的臨床回顧性分析的結果顯示，原發性肝癌的早期診斷靈敏度不足35%，診斷的一致性較差，漏診率較高[8]，導致高危人群的篩查效果明顯下降。人甲胎蛋白（AFP）為肝癌診斷的主要特異性參考指標，其在肝癌的篩查過程中具有重要的參考價值，但AFP在肝硬化或者重度肝炎等疾病也存在一定程度的異常表達，其診斷原發性肝癌的特異度較低，檢查的穩定程度較低。

GPC3主要影響細胞間的蛋白連接，其表達水平的改變能夠干預錨合蛋白、成纖維蛋白等細胞間質成分的表達，加劇癌細胞間黏附能力的下降，促進癌細胞的轉移[9-10]。GPC3結構上包含了多個磷酸基團結構，其能夠在結合肝癌上皮細胞膜糖蛋白配體的基礎上，促進細胞內信號通路或者第二信使等因子的改變，增加細胞信號轉導的異常，增加癌細胞DNA異常擴增的風險，促進癌細胞對靜脈血竇內皮細胞的黏附，增加癌細胞通過血行轉移的風險[11]。同時，GPC3能夠影響癌細胞的生物學特征，增加癌細胞的凋亡抑制，增加癌細胞對于鄰近正常組織的浸潤，導致臨床分期的進展[12]。

本文研究結果顯示，肝癌病人血清中GPC3濃度較健康對照組明顯上升，提示GPC3可能參與到了原發性肝癌的發生發展過程中，GPC3的高表達能夠通過影響肝癌細胞內的NOTCH信號通路或者AKT信號通路的激活，促進癌細胞DNA基因的高轉錄，最終促進腫瘤浸潤病灶范圍的增大。同時，過度表達的GPC3能夠增強局部癌細胞氧化應激反應，維持腫瘤干細胞的活性。已有研究結果顯示，肝癌病人血清及病灶組織中的GPC3濃度平均上升25%～55%，并且病人的臨床分期進展越快，癌細胞的分化程度越低，其GPC3蛋白的異常表達越為明顯[13-14]。但本文研究并未發現GPC3的異常表達與肝癌病人臨床分期有關，考慮可能與檢測方法、肝癌病人并發癥及GPC3表達的個體化差異等有關。本文研究結果顯示，病灶組織的范圍越大、癌細胞的分化程度越差，血清中GPC3的水平越高，提示GPC3能夠影響肝癌病人臨床病理特征的進展。本次研究并未發現GPC3表達與微血管侵犯和淋巴結轉移有關，提示GPC3并不會增加肝癌病人癌細胞對于血管內皮或者淋巴結內皮細胞的黏附能力。本文研究結果還顯示，血清GPC3水平>200 ng/L時，其診斷肝癌的靈敏度和特異度均超過80%，提示通過隨訪病人血清GPC3水平可能為臨床上肝癌病情的判斷提供參考。

綜上所述，血清GPC3可能用于原發性肝癌的診斷。

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（本文編輯 黃建鄉）