牛結核病診斷方法與防治

摘要：該文重點講述了牛結核病的診斷方法與防治，希望能促進牛羊養殖的產業發展，減少養殖損失，促進經濟的發展。

關鍵詞：牛結核病;牛型結核分枝桿菌;診斷方法;防治

中圖分類號：S858.23 文獻標識碼：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.16.096

0 引言

牛結核?。˙ovine Tuberculosis）是一種能在人畜間進行傳播的傳染病，由牛型結核分枝桿菌（Mycobacteriumbovis）引起，世界衛生組織將其列為B類疫病，在國內被列為二類疫病。牛型結核分枝桿菌可在多種環境下生存并傳播，如空氣、塵埃以及水源等人們日常的生活環境中，牛只發病后會出現咳嗽、日漸消瘦等癥狀，不僅對牛的健康造成危害，同時，由于該疫病可交叉感染，進而危害人類健康，因此，該結核病為養牛行業中危害較大的疾病之一，人們對該疫病越發地重視。

1 臨床癥狀與病理變化

結核病由結核分枝桿菌引起，結核分枝桿菌大小中等，周身不產生芽孢和莢膜，不同類型的結核桿菌，形態均有差異，牛型結核菌著色不均勻，較短粗;人型結核菌形態不一，有直的，有彎的，相比牛型結核菌身形細長，有些單獨排列，有些平行排列;禽型結核菌相對短小，呈多形性。結核分枝桿菌可主要分為3個型，分別為牛分枝桿菌（牛型）、禽分枝桿菌（禽型）及結核分枝桿菌（人型），其中牛型致病力最強，尤其是奶牛，最易感染該菌[1]。

牛結核病的潛伏期少則幾十天，多則至幾月，甚者長達數年，潛伏時間長短不一。牛結核病主要在動物淋巴結處形成病灶，常見于肺門淋巴結、縱隔淋巴結，形狀為突起的結節，呈現鈣化的現象，有的呈現空洞的形狀。結核在不同地方時呈現不同的形狀，腸結核多會出現大小不一樣的結節和呈堤狀的潰瘍在小腸或盲腸上;當肺結核時，肺部病變，會出現粟粒性病體。牛結核病沒有地域和季節限制，一年四季均有發生的可能性，過度勞役，飼養環境不潔均有可能導致該疫病的發生。

2 診斷技術

牛結核病沒有明顯的癥狀，難以簡單地通過觀察判斷牛是否感染疫病，目前國內外大多采用以下3種方法診斷牛結核?。杭毦鷮W檢查法、采用分子生物學方法、免疫學方法。

2.1細菌學檢查法

細菌學檢查法是比較傳統的診斷方法，這種方法有利于確定開放性結核病。診斷前，需對病料進行以下處理：向病牛的痰液中加入2倍安替佛尼液，放置溫箱中，1～2h后進行遠心沉淀，再將痰液用濃度為3%醋酸溶液中和沉淀物，用蒸餾水洗滌幾次;向病牛氣管內的黏液加入2倍濃度為6%的硫酸溶液后沉淀約20min，再加入少量濃度為3%的苛性鈉溶液進行中和;取病牛的糞便30g，加入安替佛尼液15mL和蒸餾水55mL，放置2～3h后再進行遠心沉淀30min，向沉淀物中加10mL點眼反應。上述病料處理完畢后，用棉拭蘸取任意病料進行細菌檢查。細菌學檢查法耗時長，工序多，檢測率低目前已逐步被先進的檢測方法取代[2]。

2.2分子生物學方法

分子生物學的發展也影響牛結核病的診斷，迄今為止，國內外研究人員越來越多地用分子生物學原理對牛結核病進行診斷，目前分子生物學診斷方法有如下3種方法。

2.2.1DNA探針檢測

DNA探針檢測可以快速檢測出牛結核病的病原菌，也可檢測出其菌株。只需要檢測樣品DNA中已經標記好的基因序列，將取得的病牛的樣品DNA與已知的標記好的DNA片段探針進行分子雜交。

2.2.2PCR檢測

PCR檢測是近年應用較為廣泛的檢測方法，研發人員利用牛分枝桿菌的pnca基因序列形成特定引物，擴展出較長的目的片段，提高PCR檢測的變異性，這種方法檢測快且檢測正確率高，但對儀器的要求高，對檢測人員的技術要求更高，目前的檢測制度尚未標準化規范化，對檢測結果的可靠性有一定影響[3]。

2.3免疫學方法

2.3.1結核菌素試驗

結核菌素試驗是目前應用最為廣泛的檢驗方法，尚未有可以替代的診斷方法，大多數研發人員常用的為純化蛋白質衍生物，又稱PPD皮內試驗。該試驗方法的優缺點非常明顯，優點是檢測率高，不足的地方是對試驗的影響因素多，物理性的化學性的都有，尤其是結核菌素的使用量、質量等都會對試驗結果產生影響。

2.3.2間接酶聯免疫吸附法

測定抗體最常用的方法是間接酶聯免疫吸附試驗，這是一種酶聯免疫吸附試驗（ELISA）方法，其原理是利用相應抗原形成抗體反應的技術，屬非競爭結合試驗。該試驗方法已經廣泛用于檢測牛結核病，操作簡單快捷是其優勢，但使用該方法時，原本就抗原性較弱的病原菌在共同的抗原決定簇作用下，會對試驗的結果產生影響，檢測準確率受到影響[4]。

3 防治

3.1預防措施

要從根源上減少牛結核病的傳播，養殖人員應提前做好預防措施，以防疫病感染至牛群。養殖人員應對牛羊進行定期疫苗注射，并定期對牛羊舍進行消毒。只有先做好預防工作，才能從源頭上減少細菌的傳播，降低牛羊感染疾病的概率。

養殖戶應定期對牛群進行檢查，至少于每年春秋進行一次檢疫。對疑似感染牛群，先進行隔離觀察，再對牛群進行診斷后再將健康牛群人群，對感染牛群及時撲殺，并嚴格按照國家要求進行處理。因牛結核病能在牛與人之間進行交互感染，除對牛群進行檢查外，也應對飼養人員定期檢查，確診為結核的病人不能再飼養牛群。養殖戶還需保持牛舍整潔干凈，至少應于每季度對牛舍進行消毒，嚴格執行防疫制度，防止細菌對環境造成感染。

3.2藥物治療

按照獸醫治療要求，及時給牛群服用異煙肼、慶大霉素、利福平等具有較強殺菌性的藥物，殺菌藥物副作用小，并不會對牛群健康造成影響。

3.3組織措施

政府應認真組織宣傳防疫的重要性，嚴格要求養殖戶按照規定實時對疫病進行監測、檢疫并在政策允許的情況下對養殖戶防疫產生的費用進行補助，這樣有利于養殖戶積極參與防疫的行動中。

3.4科研力度

目前對牛結核病的診斷方法有很多種，但尚沒有一種可以在基層養殖戶中大力推廣的有效方法，且沒有研發卅有效的預防疫苗，使養殖戶的產業受到一定的限制。因此，各方研發人員應大力推進研發力度，爭取早日研發出可以提高診斷的技術及有效的預防疫苗。

4 結束語

對牛結核病的診斷及防治方法的研究對養殖業有積極的影響，各方應排除一切干擾，提高對牛結核病的診斷研發，促進經濟的發展。

參考文獻

[1]鄭群，何述輝.淺談牛結核病診斷方法研究進展[J].獸醫導刊，2015（12）：72-73.

[2]張松柏，邱美珍，周望平.牛結核病診斷方法研究進展[J].中國奶牛，2010（1）：13-14.

[3]王金果，劉愛林，周向梅.牛結核病診斷方法的研究進展[J].中國畜牧獸醫，2010，37（7）：194-198.

[4]付建，王敏蘭，溫榮輝.牛結核病研究進展[J].畜牧與飼料科學，2007（12）：117-119.

作者簡介：任利強（1987-），男，河北承德人，本科，獸醫師，研究方向：動物疫病診斷與實驗室檢測。