椒目的生藥學研究

陳舒憶　唐藝　趙應梅　陸雅麗　莫我躍

【摘 要】目的：對椒目進行生藥學鑒定研究，為椒目的質量標準提供研究依據。方法：采用基源鑒定、性狀鑒別對椒目的來源、性狀進行鑒別;采用石蠟切片和粉末制片法研究椒目的顯微結構。結果：椒目呈類圓球形、半球形或卵形，表面黑色具光澤。顯微結構清晰，表皮細胞長方形，石細胞眾多，內種皮細胞有明顯網狀紋理，子葉海綿組織細胞排列疏松。粉末棕褐色，可見種皮表皮細胞、石細胞、內種皮細胞等。結論：椒目原植物形態特征明顯，性狀特征及顯微構造顯著，其生藥學研究可為椒目的質量標準提供充分的科學依據。

【關鍵詞】椒目;生藥學;性狀鑒別;顯微鑒別;石蠟切片

中圖分類號： R282.5文獻標識碼： A 文章編號： 2095-2457（2019）20-0224-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.20.104

椒目Semen Zanthoxyli為蕓香科植物花椒的干燥成熟種子。立秋前后果熟時采收，晾干，待果實開裂，果皮與種子分開時，取出種子即得。據記載，該藥性味苦、辛，溫。小毒。歸脾、肺、腎、膀胱經，有利水消腫，祛痰平喘等功效，用于水腫脹滿、哮喘、痰飲喘逆等癥[1]，始載于《本草經集注》。現對椒目的基源、藥材性狀、橫切面和粉末的顯微鑒別特征進行生藥學研究，旨在建立椒目的真偽鑒別方法，并為其質量標準的修訂提供依據。

1 材料和儀器

（1）材料：椒目采集于貴州貞豐、貴州遵義、陜西鳳縣等地，并經貴州中醫藥大學魏升華教授鑒定。

（2）儀器設備：Leica DM2500光學生物顯微鏡和Leica S60立體顯微鏡（德國Leica Microsystems）;Leica RM2245半自動輪轉切片機（德國Leica Biosystems）。

（3）試劑試藥：無水乙醇、乙醇、二甲苯、番紅、固綠等（國藥集團化學試劑有限公司）。

2 方法

（1）基原鑒定對原植物形態進行觀察，制作蠟葉標本，進行原植物鑒定，并描述植物形態特征。

（2）性狀鑒別使用游標卡尺測量椒目果實和種子的長度、直徑，采用肉眼和立體顯微鏡觀察椒目的形狀、大小、顏色、表面特征、質地、斷面、氣味等。

（3）顯微鑒別采用石蠟切片法[2]研究椒目的顯微結構。取椒目，煮沸數分鐘后，在水中浸泡過夜，放入70% FAA固定液（70%的乙醇90ml，冰醋酸5ml，37%甲醛5ml）中固定24h，依次在不同濃度的乙醇中逐級脫水，乙醇濃度按順序依次為70%、80%、90%、95%、100%，每次1h。脫水后先用無水乙醇-二甲苯（1：1）浸泡1h;再用二甲苯浸泡1h，反復2次。后置于65℃恒溫箱中浸蠟，每隔30min加固體石蠟1次，反復3次，置換成純石蠟后在恒溫箱中放置6h，使石蠟充分浸入種子中。包埋后修塊、切片。切好的蠟片在展片臺上展開、貼片，再置50℃烘箱中烘干。在二甲苯中脫蠟，乙醇復水后番紅染色1h左右，60%、70%、80%、90%的乙醇逐級脫水后，入固綠溶液中染色2min，脫水后二甲苯透明封片。采用Leica DM2500光學生物顯微鏡觀察、拍照，圖片均用Leica LAS V4.3顯像系統處理。

3 結果

1）植物形態特征花椒落葉灌木或小喬木，枝有短刺，小枝上的刺基部寬而扁且勁直的長三角形，當年生枝被短柔毛。葉有小葉5-13片，葉軸常有甚狹窄的葉翼;小葉對生，無柄，卵形，橢圓形，稀披針形，位于葉軸頂部的較大，近基部的有時圓形，長2-7厘米，寬1-3.5厘米，葉緣有細裂齒。葉背基部中脈兩側有叢毛或小葉兩面均被柔毛，中脈在葉面微凹陷，葉背干后常有紅褐色斑紋?；ㄐ蝽斏蛏趥戎χ敚ㄐ蜉S及花梗密被短柔毛或無毛;花被片6-8片，黃綠色，形狀及大小大致相同;雄花的雄蕊5枚或多至8枚;退化雌蕊頂端叉狀淺裂;雌花很少有發育雄蕊，有心皮3或2個，間有4個，花柱斜向背彎。果紫紅色，單個分果瓣徑4-5毫米，散生微凸起的油點，頂端有甚短的芒尖或無?；ㄆ?-5月，果期8-10月[3]。

2）性狀特征本品呈類圓球形、半球形或卵形，種臍斜平，直徑3-5毫米。表面黑色具光澤，可見細密的魚鱗狀紋理，有的部分表皮脫落，露出黑色魚網狀紋理。質堅硬，剖開可見淡黃白色的胚乳及兩枚子葉，顯油性。氣香，味微麻、辣。如圖2所示。

3）顯微特征

（1）本品橫切面：表皮細胞長方形，柵狀，大小相近，外被有角質層，其下有眾多石細胞，相聚成帶，細胞形狀各異，大小不一，紋孔及孔溝清晰。內種皮細胞數列，有明顯的網狀紋理，木化。胚乳細胞多列，多角形，細胞壁薄。子葉表皮細胞1-2列，海綿組織細胞排列較疏松。胚乳細胞及子葉細胞內含油滴及糊粉粒[4-5]。如圖3所示。

（2）粉末特征本品粉末棕褐色，種皮表皮細胞多角形，棕紅色，長28-80μm，直徑20～58μm，垂周壁念珠狀增厚，少數均勻增厚，有的細胞較大，內充滿黃棕色透明分泌物。石細胞類圓形、類方形或橢圓形，棕黃色，紋孔和孔溝清晰。內種皮細胞淡黃色，網狀增厚明顯，木化。如圖4所示。

4 討論

顯微鑒定是中藥材真偽鑒別的重要方法，是中藥鑒定必不可少的手段之一。但在椒目石蠟切片的制作過程中發現，椒目硬度大，溶液不宜滲入，切片時易脫落，切片難度大。通過研究比較，新鮮椒目相較于干燥的椒目，更易制作出效果良好的石蠟切片。在石蠟切片的制作過程中，表皮細胞易脫落，柵狀結構易破碎，制作時應格外注意。本文對椒目進行了詳細的生藥學研究，為椒目質量標準的制定提供參考依據。

【參考文獻】

[1]江蘇新醫學院，中藥大辭典（上冊）[M].上海：上海人民出版社，1977：2292.

[2]趙中振，陳虎彪.中藥顯微鑒定圖典[M].福州：福建科學技術出版社，2016.

[3]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學出版社，1996.

[4]曹蔚，薛美玲，謝艷華，等.椒目種皮的石蠟切片制備方法及顯微鑒別研究[J].陜西中醫，2012，33（3）：352-354.

[5]王少平.椒目質量標準研究及椒目脂肪酸SFODLPME_GC測定方法的建立[D].山西醫科大學，碩士學位論文，2017.