載基因磁性脂質微泡的制備及對人HepG2細胞的生長抑制作用研究*

李華梅，景香香，劉元稅

（海南省人民醫院，海南 海口 570311）

近年來，隨著醫學分子影像學的發展，靶向超聲 微泡在超聲分子顯像及治療中的研究和應用愈來愈受到學者們的廣泛關注。本研究在脂質微泡中負載磁靶向納米粒子并攜帶基因，研制出一種新型的載基因磁性脂質微泡，這樣既可以在外加磁場的作用下實現基因的靶向高效定位釋放，又可以利用磁性粒子的磁感應升溫特性對腫瘤細胞進行熱療，為今后實現該磁性脂質微泡用于腫瘤的聯合治療提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試劑

FeCl3·6H2O、FeCl2·4H2O、氨水、PEI、DSPC、DPPE（美國Sigma公司），SF6氣體、吐溫80、甘油、丙二醇、pEGFP-C1（4.7 kb）、Fe3O4磁性納米粒子（海南省人民醫院中心實驗室制備并儲存），PLXSN質粒、Ecoli DH5Q和人肝癌細胞系HepG2（海南省人民醫院中心實驗室儲存）。

1.2 儀器

能譜儀（Thermo NORAN,vantage,美國），機械振蕩儀（重慶影像研究所），SPG-06A高頻磁感應加熱設備（深圳雙平高頻加熱器廠），掃描電鏡（日本JEOL JsM-6360LV），流式細胞儀（FACS vantage SE 型,美國Becton-Dickson制造），激光粒度分析儀（英國MALVERN公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 載基因磁性脂質微泡的制備將 3 種有機磷脂按一定比例充分溶解于有機溶劑中，加熱30 min使有機溶劑蒸發完全，將葡萄糖和丙二醇按比例配置的水合液加入西林瓶中，超聲分散后使其形成脂質懸液。在此懸液里先加入一定量的PEG4000和吐溫800.01 ml后，將一定量DNA/PEI/Fe3O4和明膠按比例加入到脂質懸液中，用注射器充入定量的SF6氣體置換西林瓶上方的空氣。將西林瓶放入機械振蕩器中振蕩60 s，即得載基因磁性脂質微泡。

1.3.2 磁性脂質微泡體外升溫實驗……