人鉀離子通道調節蛋白的原核表達及純化①

郭林紅 周 煒

(北京大學第一醫院風濕免疫科,北京100034)

人含有鉀離子四聚化結構域蛋白(Potassium channel tetramerization domain-containing protein，KCTD)是一個包含25個成員的蛋白質家族，其中每個成員的N-末端都包含一個與鉀離子通道四聚化T1結構域類似的結構域，但每個成員的C-末端序列不同，有著不同的生物功能[1]。目前該蛋白質家族的結構功能研究尚不深入，有文獻報道，KCTD蛋白家族的一些成員可能參與癌癥的發生或發展，如 KCTD9位于染色體8p22片段上，這個片段在肝癌、肺癌及其他許多癌癥中常常缺失；KCTD10和KCTD12可能與胃腸道間質瘤有關[2]。

鉀離子通道調節蛋白(Potassium channel regulator,KCNRG)是KCTD的家族成員之一，其基因位于染色體13q14.3片段上，包括3個外顯子和2個剪接異構體，分別編碼KCNRG-L(mRNA isoform NM-173605.1，272aa)和KCNRG-S(mRNA isoform NM-199464.2，229aa)兩種亞型蛋白，它們的C端不同，具有184aa長度的共N端，其中四聚化T1結構域覆蓋位置含7～98氨基酸[3,4]。慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤以及前列腺癌的發生可能與該基因的缺失、突變有關，同時KCNRG也可能是一個抑癌基因[3-5]。有文獻報道KCNRG蛋白可以通過四聚化T1結構域形成多聚體，對電壓門控鉀離子通道hKv1.1和hKv1.4產生作用，減少鉀離子內流[5]。KCNRG影響腫瘤生成的分子機制還不清楚，而明確KCNRG與其他蛋白的相互作用，是闡明其抑癌機制的關鍵。在基因組水平使用酵母雙雜交技術篩查蛋白-蛋白相互作用的研究中，KCNRG可能與CCNK、FXR2、DGCR6L、AP5B1以及自身相互作用，其中一些蛋白-蛋白相互作用(如KCNRG與CCNK)可能與細胞增殖相關，但上述結果需要使用更多方法進一步驗證[6]。

還有文獻報道KCNRG蛋白主要分布在小氣道上皮……