S1PR1基因慢病毒轉染對EAE小鼠調節性T細胞及IL-17、IFN-γ水平的影響

張 瑤 李作孝

(西南醫科大學附屬醫院，瀘州646000)

多發性硬化癥(Multiple sclerosis，MS)是一種中樞神經系統(Central nervous system,CNS)自身免疫性炎癥性疾病，其病理特征為慢性炎性脫髓鞘，星型膠質細胞反應性增殖，常伴有不同程度的軸突受損，目前MS的病因及發病機制尚未明確，研究表明MS可能是由遺傳因素和環境因素相互作用引發的免疫失調引起[1]。臨床上常用于MS的治療藥物包括大劑量甲潑尼龍沖劑治療，免疫調節治療(如β-干擾素、芬戈莫德)等，其中芬戈莫徳(FTY-720)在2010年9月成為首個被美國食品與藥品管理局(FDA)批準用于治療復發型多發性硬化癥(Relapsing-remitting multiple sclerosis,RRMS)的口服免疫抑制劑，FTY-720在MS的治療中的主要機制是在體內磷酸化后，作為1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine-1-phosphate,S1P)受體調節劑，通過與T淋巴細胞表達的鞘氨醇-1-磷酸1型受體(Sphingosine-1-phosphate receptor 1)結合，促使外周循環中T淋巴細胞歸巢，以減少T淋巴細胞在中樞神經系統(CNS)中的破壞性浸潤[2]。大量研究表明S1P/S1PR1信號通路在T淋巴細胞成熟、歸巢以及遷移中具有核心作用[3]。因此以S1P/S1PR1信號通路上下游為靶向目標的藥物研究也是目前的熱點。本實驗選用病理特征、生化指標、臨床癥狀與MS相似的實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠作為動物模型[4]，經外周轉染攜帶目的基因S1PR1的慢病毒(LV-S1PR1)，通過觀察小鼠臨床癥狀、脾臟中調節性T細胞比例及脊髓組織中炎癥因子表達的水平，探討外周轉染LV-S1PR1對EAE小鼠發病的影響及產生該影響可能的機制，期望為S1P/S1PR1信號通路中靶向藥物的研發提供實驗依據及新的思路。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗……