陳志雄王洪海 張 峰
(1原南京軍區司令部農副業基地,江蘇南京 210016;2中牧實業股份有限公司,北京 100070)
仔豬腹瀉是制約養豬業經濟效益的重要疾病之一。引起仔豬腹瀉的病因較為復雜,多種病原,如豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬德爾塔冠狀病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)、傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬輪狀病毒(RV)、大腸桿菌、球蟲,以及飼養管理不當,如飼養密度過大、豬舍通風不良、豬群應激、營養不良等因素均可導致該病的發生。防控仔豬腹瀉必須查明病因,采取綜合防治措施才能見效。
PEDV可引起豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea,PED),該病對新生仔豬危害極大,臨床主要表現為腹瀉、嘔吐、脫水,感染后死亡率高。PEDV通常與TGEV、PDCoV等共同導致豬胃腸炎和腹瀉的發生。PDCoV于2012年首次在香港的豬群中被發現,于2014年在美國腹瀉仔豬和母豬的糞便中首次被檢測到,隨后在我國四川、江西等地腹瀉豬的臨床樣品中也分離到PDCoV毒株。
本文報道了江蘇省某規模化豬場產房仔豬混合感染PEDV和PDCoV引發腹瀉的病例,通過流行病學、病理變化以及實驗室PCR/RT-PCR檢測結果,最終確診,并采取緊急免疫豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗(HB08株+ZJ08株) (商品名“腹康”),添加保肝解毒、提高機體免疫力的藥物等綜合防控措施,取得明顯的效果。
2018年10月初,江蘇省某規模化豬場產房仔豬出現較大規模的腹瀉流行,仔豬出生后約2 d開始嘔吐、黃色水樣腹瀉,發病比例約40%,使用常規抗生素治療效果較差。該場獸醫聯系中牧實業股份有限公司(以下簡稱“中牧股份”)業務經理及技術人員,咨詢腹瀉疫情控制方案。
現場剖檢可見,病豬腸道內充滿黃色液體,腸壁變薄并呈透明狀,腸系膜充血,其他組織未見異常。此外,個別仔豬出生后即出現外陰紅腫現象(圖1)。推斷豬群可能感染病毒性腹瀉疾病,同時伴有霉菌毒素中毒現象。

圖1 發病仔豬臨床癥狀及剖檢結果
將發病仔豬的肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及淋巴結,適量取樣研磨后反復凍融3次,勻漿20 min,收集勻漿液12 000 r/min離心10 min,取上清液,用TaKaRa MiniBEST Viral DNA/RNA Extraction kit Ver.5.0試劑盒提取總DNA/RNA,分別進行CSFV、PRRSV(經典毒株/高致病性毒株)、NADC30、PRV、PCV2、PCV3、PEDV、PDCoV的PCR/RT-PCR擴增,病原核酸PCR檢測方法及擴增目的基因片段大小見表1。反應結束后,吸取5 μL PCR產物于1%1×TAE瓊脂糖凝膠中電泳檢測。結果顯示3頭仔豬均為PEDV和PDCoV混合感染,見表2、圖2~9。
通過與豬場獸醫溝通后,了解到該場每年9—10月份免疫腹瀉疫苗,而發病時還未免疫疫苗。另據了解,在病發約2個月前,豬場曾經購買使用過1批霉變玉米,可能導致豬群發生霉菌毒素中毒,與仔豬初生后即表現外陰紅腫的臨床表現相符。

表1 病原核酸PCR檢測方法及擴增目的基因片段大小

表2 樣品病原檢測結果
綜上所述,該場可能是由于豬群發生霉菌毒素中毒導致免疫抑制,同時免疫腹瀉疫苗不及時,最終造成PEDV及新型腸道致病冠狀病毒PDCoV混合感染而發病。

圖2 CSFV核酸檢測凝膠電泳圖

圖3 PRRSV核酸檢測凝膠電泳圖

圖4 PRRSV NADC30株核酸檢測凝膠電泳

圖5 PRV核酸檢測凝膠電泳圖

圖6 PCV2核酸檢測凝膠電泳圖

圖7 PCV3核酸檢測凝膠電泳圖

圖8 PEDV核酸檢測凝膠電泳圖

圖9 PDCoV核酸檢測凝膠電泳圖
采取綜合防措施如下:
⑴全群母豬普免中牧股份豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗(HB08株+ZJ08株) (商品名“腹康”)2頭份,15 d后未生產母豬加強免疫2頭份,產房初生仔豬緊急免疫,肌注1頭份。
⑵立即停止使用劣質玉米,添加脫霉劑;
⑶在母豬飼料中添加黃芪多糖、電解多維、小蘇打、葡萄糖,提高免疫力,增加飼料能量攝取;
⑷在產房使用密斯陀干粉,噴霧帶豬消毒,降低濕度,同時注意保證產房環境溫度;
⑸腹瀉嚴重、脫水的仔豬處死后,進行無害化處理,減少病原傳播。
采取以上防控措施2周后,回訪豬場,腹瀉疫情得到明顯控制,產房基本恢復正常生產,新生仔豬沒有再出現腹瀉情況。
該案例說明當前豬群中如存在霉菌毒素中毒等免疫抑制因素,可能會間接誘導腹瀉類疾病暴發,這為腹瀉的防控帶來難度。對于該案例中的PEDV和PDCoV的混合感染,雖然目前尚無有效的PDCoV疫苗,但在控制其他相關疾病的前提下,豬群仍可通過提高自身免疫力對PDCoV感染產生一定的抵抗能力。