子癇前期患者血清PTEN水平變化及其與氧化應激和妊娠結局的關系

王玉婷 ，劉亞軍，孫妍，李文婷

(青島市婦女兒童醫院，青島266011)

子癇前期(preeclampsia，PE)是常見的妊娠期疾病，主要表現為在妊娠20周以后出現的高血壓、高蛋白尿，可對患者的心、肝、腎、腦等重要臟器造成一定損傷，并且可導致胎兒宮內缺氧、生長受限甚至胎死宮內，對患者及胎兒的健康造成巨大威脅[1]。第10號染色體缺失性磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)是一種抑癌基因，可通過負調控PI3K/AKT途徑調節細胞的增殖、遷移等，過往研究[2，3]多圍繞其與惡性腫瘤展開。然而近年研究[4]顯示，PTEN在PE患者胎盤組織及外周血中呈異常表達，且表達水平與新生兒的預后有關，提示其可能在PE的疾病進展中起到一定的作用。氧化應激反應的激活是PE發病的重要環節[5]，而PTEN是一種與氧化應激密切相關的基因，但目前少有PTEN在PE氧化應激中的作用機制相關研究報道。我們觀察了PE患者血清PTEN的表達變化，進一步分析其與PE患者氧化應激指標及不良妊娠結局的關系，以探討PTEN在PE中的表達及臨床意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年3～12月間我院收治的PE患者116例，均符合以下納入排除標準，納入標準：參考第八版《婦產科學》中關于PE的診斷標準[6]，入選病例均確診為PE；均為單胎妊娠；均為自然受孕；④對本次研究內容知情，且在知情同意書中簽字。排除標準：合并有惡性腫瘤者；合并有其他妊娠期疾病者；合并重要臟器功能損傷者；④合并精神疾病、認知功能障礙、免疫功能障礙者；⑤不在我院生產者。根據疾病嚴重程度[6]將116例PE患者分為重度PE組52例、輕度PE組64例。另選取同期在我院體檢的健康妊娠女性50例作為對照組。三組一般資料見表1。重度PE組的舒張壓和收縮壓高于輕度PE組，重、輕度PE組的舒張壓、收縮壓、體質量指數高于對照組，差異均有統計學意義(P均<0.05)。本次研究通過我院倫理委員會的批準。

1.2 各組血清血清PTEN、8-iso-PGF2α、MDA、SOD檢測 抽取三組空腹靜脈血5 mL，采用3 000 r/min離心10 min，收集上清液，采用酶聯免疫吸附法檢測血清PTEN、8-異前列腺素F2α(8-iso-prostaglandin F2α，8-iso-PGF2α)，采用硫代巴比妥酸比色法檢測血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)，采用黃嘌呤氧化酶法檢測血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD),相關試劑盒購于南京建成生物工程研究所，嚴格遵循相關試劑盒說明書進行操作。重復3次，取平均值。

表1 三組一般資料比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與輕度PE組比較，*P<0.05。

1.3 妊娠結局觀察 PE患者均隨訪至分娩，記錄母親及新生兒的健康情況，若出現胎盤早剝、子癇、HELLP綜合征、醫源性早產或引產、胎兒生長受限、胎兒窘迫、胎兒死亡等中的任意一項或多項則視為存在不良妊娠結局。

1.4 統計學方法 采用SPSS20.0統計軟件進行處理。計數資料以%表示，采用χ2檢驗；計量資料均符合正態分布，以表示，多組間比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-t檢驗；Pearson相關性分析法分析血清PTEN水平與PE患者體質量指數、舒張壓、收縮壓及血清8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平相關指標的相關性；采用非條件Logistic多元回歸分析不良妊娠結局的獨立危險因素以妊娠結局為應變量，其余指標為自變量，建立非條件Logistic多元回歸模型。不良妊娠結局賦值為1，正常妊娠結局賦值為0，自變量均以均值為界，低于均值則為低表達，高于均值則為高表達，其中低表達賦值為1，高表達賦值為0。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

三組血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較見表2。

表2 三組血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與輕度PE組比較，*P<0.05。

116例PE患者中正常妊娠80例,不良妊娠36例。不同妊娠結局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較見表3。

表3 不同妊娠結局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較

注：與正常妊娠者比較，＊P<0.05。

血清PTEN水平與PE患者舒張壓、收縮壓及血清8-iso-PGF2α、MDA水平呈負相關(r分別為-0.382，-0.367，-0.451，-0.432；P均<0.05)，與血清SOD水平呈正相關(r=0.534；P<0.05)，與體質量指數無關(r=-0.138；P>0.05)。

血清PTEN、SOD水平過低是PE患者不良妊娠結局的獨立危險因素(P<0.05),見表4。

表4 PE患者不良妊娠結局的非條件Logistic多元回歸分析

3 討論

PE是導致孕婦和圍產兒死亡的重要原因之一，鄒郁松等[7]對7 794例高危及危重孕產婦的臨床資料進行整理，結果顯示重度PE和(或)子癇是排在首位的危重疾病，占比高達59.25%。目前PE的具體發病機制尚未完全闡明，兩階段學說是關于PE發病機制的經典理論，其認為PE發病主要分為兩個階段，第一階段為滋養層細胞浸潤能力下降，導致滋養細胞浸潤子宮螺旋動脈過淺，使得胎盤出現缺血、缺氧現象，進而促進大量的胎盤因子分泌，第二階段為胎盤因子進入母體血液循環，激活炎癥反應和氧化應激反應，導致血管內皮細胞功能受損，進而引發一系列的病變[8]。從兩階段學說可以看出，氧化應激的激活是PE的重要病理改變。PTEN是一種蛋白酪氨酸磷酸酯酶，其催化活性依賴于高反應活性的半胱氨酸，然而半胱氨酸極易被氧化，因此在過氧化的壞境下易導致PTEN氧化失活[9]。除此之外，PTEN也可以調節氧化應激反應，楊玲竹等[10]研究顯示，PTEN可通過正向調控抗氧化蛋白Peroxiredoxin Ⅱ的表達來起到抗氧化作用。由此可見，PTEN與氧化應激密切相關，然而PTEN是否能通過介導氧化應激來參與PE的疾病進展還有待進一步的研究。

氧化應激是指體內氧化與抗氧化系統失衡，主要表現為活性氧、氧化產物增多，抗氧化酶減少，導致機體被過度氧化。8-iso-PGF2α是氧自由基攻擊細胞膜上的花生四烯酸而形成的穩定產物，而MDA是脂質過氧化反應的終末產物，二者均是常見的過氧化產物，SOD是生物體內重要的抗氧化酶，是機體消除氧自由基的重要蛋白[11，12]。本研究結果顯示，重、輕度PE組血清中8-iso-PGF2α、MDA水平高于對照組，而SOD水平低于對照組，說明PE患者體內的存在明顯的氧化應激。本研究還顯示，PTEN在PE患者血清中呈低表達，且其表達水平與舒張壓、收縮壓、8-iso-PGF2α、MDA呈負相關，與SOD呈正相關。血管內皮功能受損是血壓升高的病理基礎[13，14]。閆博陽等[15]研究顯示，PTEN可逆轉氧化低密度脂蛋白對動脈粥樣硬化小鼠血管內皮功能造成的損傷，其作用機制可能與STAT3信號通路的激活有關。另一方面，PTEN也可以通過調節氧化應激來減輕血管內皮細胞的氧化損傷。因此可以推測，PTEN主要通過調節血管內皮功能來影響血壓。Iwasa 等[16]研究顯示，PTEN表達下調可導致氧化產物增多。研究[17]顯示，PTEN可降低細胞內活性氧的水平，并可調控Cu/Zn-SOD蛋白的表達。由此可見，PTEN參與了氧化與抗氧化系統的調節，可抑制機體的氧化應激，進而影響8-iso-PGF2α、MDA、SOD等的水平。臨床治療PE的主要思路是降低患者的血壓、改善妊娠結局，然而由于孕期治療受到諸多限制，早產、胎兒生長受限、胎兒窘迫等不良妊娠結局依然時有出現[18]。本研究結果顯示，PTEN、SOD水平過低是PE患者不良妊娠結局的獨立危險因素。這可能是由于PTEN、SOD水平過低會導致機體出現氧化性損傷，加重PE患者的病情，進而影響患者的妊娠結局。然而本次研究選取的病例數較少，且為單中心研究，以上結論還有待多中心、多病例數的研究進行驗證。

綜上所述，PTEN在PE患者血清中呈低表達，且其表達水平與機體的氧化應激程度有關。血清PTEN水平過低是PE患者不良妊娠結局的獨立危險因素。血清PTEN可能在PE的疾病進展中起到一定的作用。