多囊卵巢綜合征患者血清結合珠蛋白、半乳糖凝集素-3水平變化觀察

劉俠，金鳳斌，韓麗萍，杜冠華，何英慧

(錦州市婦嬰醫院，遼寧錦州121000)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種以性腺軸紊亂失調為主的全身性的、復雜的神經—內分泌—代謝網絡失調癥候群，好發于育齡期婦女，主要表現為胰島素抵抗、性激素水平變化，對機體近期不利影響表現為月經周期紊亂、不孕或流產、多毛和(或)痤瘡等，遠期不利影響則表現為糖尿病、子宮內膜癌、乳腺癌等[1，2]。既往研究[3]證實，胰島素抵抗是PCOS的重要發病機制之一，隨著對疾病發病機制的不斷深入，發現PCOS患者存在性激素、氧化應激等多種生化指標的異常表達。半乳糖凝集素-3(Galectin-3) 是凝集素家族成員，其在調節肥胖、葡萄糖水平以及炎癥中起重要作用[4]。結合珠蛋白(Hp)是一種酸性糖蛋白，主要在肝臟合成，其在結合游離血紅蛋白、抗氧化應激、抗炎等方面發揮重要作用[5]。目前臨床少有血清Galectin-3、Hp表達與PCOS關聯性的相關報道。2016年1月～2018年10月我們觀察了PCOS患者血清Hp、Galectin-3的水平變化，并分析其與胰島素抵抗、血清性激素水平的相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年1月～2018年10月期間本院收治的初診PCOS患者107例為PCOS組，另采用分層抽樣的方法選取同期因輸卵管因素或男方因素致使不孕的婦女90例作為對照組，本研究經我院倫理委員會審核批準。其中PCOS組納入標準：①均符合《多囊卵巢綜合征的診斷和治療專家共識》[6]的相關診斷標準；②均為育齡期已婚婦女，性生活正常者；③患者及其家屬知情本次研究并簽署了同意書。對照組納入標準：①月經周期規律、血清激素水平、基礎體溫雙相正常；②B超結果顯示子宮及雙側附件均未見異常。排除標準：①合并惡性腫瘤、肝腎功能不全、心血管疾病者；②合并內分泌疾病或代謝性疾病者；③近3個月內有避孕藥、降血脂、降糖、糖皮質激素類藥物史者；④合并精神性疾病或認知功能障礙者；⑤因其他疾病引起的Galectin-3、Hp水平升高者。其中PCOS組年齡20～37(31.29±4.83)歲；體質量指數21.6～25.8 (22.91±0.67)kg/m2。對照組年齡21～36(31.56±3.26)歲；體質量指數21.5～25.9(23.06±0.83)kg/m2。兩組研究對象一般資料比較差異無統計學意義。

1.2 血清Hp、Galectin-3檢測 兩組均采集月經周期的第2～6天早晨8～10點空腹肘靜脈血6 mL，血標本常溫下2 500 r/min離心10 min，有效離心半徑8 cm，分離血清，-80 ℃保存備用。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清Hp、Galectin-3水平，試劑盒購自浙江藍森生物科技有限公司，嚴格遵守試劑盒操作進行。重復3次，取平均值。

1.3 胰島素抵抗指標檢測 兩組于空腹下狀態下服用75 g 無水葡萄糖，30、60、120 min后抽取其肘靜脈血，采用化學發光法(試劑盒來源于美國DEL公司)檢測血清空腹胰島素(FINs)，采用美國強生穩豪型血糖儀檢測空腹血糖(FBG)，測算穩定模型胰島素抵抗指數(HOMA-IR)，HOMA-IR=FBG×FINS/22.5。隨后根據HOMA-IR診斷標準：HOMA-IR ≥ 2.69，將PCOS 組分為非胰島素抵抗和胰島素抵抗。重復3次取，平均值。

1.4 血清性激素指標檢測 兩組均采集月經周期的第2～6天早晨8～10點空腹肘靜脈血6 mL，血標本常溫下2 500 r/min離心10 min，有效離心半徑8 cm，分離血清，-80 ℃保存備用。采用免疫化學發光法檢測血清卵泡雌激素(Follicle stimulating hormone，FSH)、雌二醇(Estradiol，E2)、促黃體生成素(Luteinizing hormone，LH)、睪酮(Testosterone，T)、催乳素(Prolactin，PRO)，儀器選用東芝40型全自動生化分析儀，嚴格遵守試劑盒操作進行。重復3次，取平均值。

1.5 統計學方法 采用SPSS24.0統計學軟件進行處理。計量資料以描述，組間比較采用檢驗；Pearson相關分析法分析血清Hp、Galectin-3與PCOS患者胰島素抵抗指標、性激素指標的相關性。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清Hp、Galectin-3水平比較 結果見表1。

表1 兩組血清Hp、Galectin-3水平比較

注：與對照組比較，＊P<0.05；與非胰島素抵抗者比較，#P<0.05。

2.2 兩組HOMA-IR比較 PCOS組、對照組HOMA-IR分別為2.28±0.82、1.41±0.75(P<0.05)。PCOS胰島素抵抗、非胰島素抵抗者HOMA-IR分別為2.42±0.76、2.09±0.89(P<0.05)。

2.3 兩組血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比較 結果見表2。

表2 兩組血清FSH、LH、E2、T、PRO水平比較

注：與對照組比較，＊P<0.05；與非胰島素抵抗者比較，#P<0.05。

2.4 血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者胰島素抵抗指標、性激素指標的相關性分析 血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者血清HOMA-IR、LH、T水平均呈正相關(r分別為0.489，0.628，0.426，P均<0.05；r分別為0.473，0.603，0.403，P均<0.05)，與FSH、E2、PRO水平均無顯著相關性(r分別為0.105，0.084，0.132，P均>0.05；r分別為0.098，0.187，P均>0.05)。

3 討論

PCOS是由基因遺傳、生活環境、生活習慣等導致的多因素疾病，其病因至今尚未闡明。研究[7]認為，PCOS的發生可能涉及下丘腦-垂體-卵巢軸的調節功能異常、腎上腺內分泌功能異常、胰島素抵抗等，而這之中胰島素抵抗可能是PCOS病情發展的始動因素和中心環節。炎癥學說已成為PCOS發病機制的研究熱點之一。同時最新研究[8]指出，PCOS患者因機體存在糖脂代謝障礙、性激素分泌異常以及胰島素抵抗，致使機體體內發生的促氧化與抗氧化處于失衡狀態，引起氧化應激。氧化應激與低級慢性炎癥之間可產生惡性循環，最終可能參與著PCOS的病情進展，而PCOS患者氧化應激反應與胰島素抵抗關系密切。本次研究中，PCOS組HOMA-IR及血清LH、T水平顯著高于對照組，也證實了PCOS患者胰島素抵抗、性激素指標存在異常變化。

Hp屬于血清α2球蛋白的組成成分，其主要生理功能是與游離血紅蛋白結合形成較為穩定的Hp-血紅蛋白復合物，游離血紅蛋白可產生活性氧，因此Hp可降低體內氧化應激水平，發揮抗氧化劑效果[9]。研究[10]發現，Hp可通過與CD162受體與高遷移率族蛋白1結合，結合后產生的復合物可誘導產生抗炎酶以及細胞因子，進而發揮抗炎效應。Carvalho等[11]研究發現，PCOS患者血漿中的Hp呈升高狀態，并且與C反應蛋白的表達呈負相關，張麗靜等[12]研究也表明，PCOS患者血清Hp表達與胰島素抵抗密切相關。可見Hp作為一種抗炎因子，可能參與著PCOS的生理病理發展過程。Galectin-3是半乳糖結合凝集素家族中的一員，大約30 kDa，是一種β-半乳糖苷結合蛋白，主要參與細胞分化、遷移、黏附、增殖、凋亡及新生的血管生成等，其可在各種細胞和組織中表達，如嗜酸性粒細胞、巨噬細胞以及胃腸道、女性生殖道、呼吸道等上皮細胞等。近年來不少研究[13]表明，Galectin-3在調節葡萄糖水平、炎癥中發揮重要作用，可作為促炎因子與脂多糖結合，激活TLR配體及下游信號分子，促進炎癥通路NF-κb的活化，而NF-κb的的激活則可進一步釋放如白介素-6、腫瘤壞死因子-α等炎癥細胞因子的釋放。而劉仲尼等[14]研究亦發現，巨噬細胞中Galectin-3可誘發胰島素抵抗，巨噬細胞可分泌Galectin-3，而Galectin-3又可通過趨化作用誘導巨噬細胞入侵至胰島素靶組織，與胰島素受體結合后，抑制胰島素及其下游信號通路，致使葡萄糖轉運體對葡萄糖的轉位作用降低，形成惡性循環，誘發胰島素抵抗;同時其研究還發現抑制Galectin-3水平對于胰島素抵抗具有一定的改善效果。故猜測Galectin-3可能作為重要的促炎癥介質參與著PCOS的低級慢性炎性狀態中。

本次研究結果表明，胰島素抵抗者HOMA-IR及血清LH、T水平顯著高于非胰島素抵抗者，表明PCOS患者部分性激素指標、胰島素抵抗指標均存在異常升高，PCOS組血清Hp、Galectin-3水平顯著高于對照組，且存在胰島素抵抗者其水平較無胰島素抵抗者高，表明PCOS患者存在血清Hp、Galectin-3水平異常升高現象，且血清Hp、Galectin-3水平可能影響著PCOS患者的胰島素抵抗。PCOS患者Galectin-3水平升高可能因其可直接結合胰島素受體，抑制胰島素及其下游轉導信號通路，致使葡萄糖轉運體-4對葡萄糖的轉位作用消失，加重機體胰島素抵抗[15]。而Hp水平升高的原因可能是因為PCOS患者處于低級慢性炎性狀態，炎性因子可通過信號轉導與轉錄激活因子3誘導細胞分泌Hp。

綜上所述，PCOS患者血清Hp、Galectin-3水平異常升高。血清Hp、Galectin-3水平與PCOS患者血清FINS、FBG、HOMA-IR、LH、T水平均呈正相關。血清Hp、Galectin-3水平改變可能與患者胰島素抵抗指標、性激素指標水平有關，Hp、Galectin-3可能在PCOS的發生、發展中發揮重要作用。早期監測血清Hp、Galectin-3水平有助于預測PCOS患者的病情發生與發展，為臨床診療提供依據。