脂肪和滑膜來源間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化能力的比較

王 洋，宋卓悅，連曉磊，李江南，丁 康，李廣恒

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科 鄭州450052

膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎為骨科的常見病和多發(fā)病，發(fā)病原因有高齡、肥胖、外傷、遺傳等。多種細(xì)胞因子代謝紊亂，蛋白聚糖及Ⅰ、Ⅱ型膠原降解，透明質(zhì)酸減少等原因共同導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨細(xì)胞代謝紊亂，最終導(dǎo)致骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生[1-2]。目前尚缺乏有效的途徑來對抗軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的丟失和軟骨細(xì)胞的凋亡[3]。間充質(zhì)干細(xì)胞是一類多向分化的干細(xì)胞，具有分化為軟骨細(xì)胞并治療軟骨病損的潛力[4]。研究[5-6]表明多種來源的間充質(zhì)干細(xì)胞，如骨骼肌來源的間充質(zhì)干細(xì)胞、滑膜來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(synovial-derived stem cells，SDSCs)、骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞等可以用于膝關(guān)節(jié)早期骨性關(guān)節(jié)炎軟骨病損的治療。關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射間充質(zhì)干細(xì)胞治療早期骨性關(guān)節(jié)炎已取得了良好效果[7-9]。本研究觀察了SDSCs及脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)、炎性軟骨細(xì)胞(inflammatory chondrocyte，ICs)體外成軟骨分化能力的差異，以尋找更為合適的治療骨性關(guān)節(jié)炎軟骨病損的種子細(xì)胞。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源與主要試劑選擇鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科2016年12月至2017年12月行人工膝關(guān)節(jié)表面置換術(shù)的骨性關(guān)節(jié)炎患者，男10例，女10例，取其負(fù)重區(qū)髕下脂肪墊、滑膜組織以及剝離的軟骨進(jìn)行原代培養(yǎng)。患者及家屬均知情同意，實驗已通過鄭州大學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)(倫理批準(zhǔn)號：81472136)。膠原酶Ⅵ、胰蛋白酶、阿爾新藍(lán)及番紅O試劑為美國Sigma公司產(chǎn)品；qRT-PCR試劑盒以及反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自TaKaRa公司；DMEM培養(yǎng)基購自美國Gibco公司；……