循環機械牽張對骨髓間充質干細胞成纖維分化的促進作用

王肖帆，王瑩瑩，王君敏，陳璐璐，徐 鋒，喬艷華，張志磊，任琛琛，胡孟彩，吳惠琰，王魯文，崔世紅，趙 冰

1)鄭州大學第三附屬醫院婦產科 鄭州 450052 2)鄭州大學基礎醫學院人體解剖學系 鄭州 450001 3)許昌市中心醫院婦產科 許昌 461000 4)鄭州大學第三附屬醫院保健部 鄭州 450052

盆底功能障礙疾病(pelvic floor dysfunction，PFD)是一種多因素導致的盆底支持組織薄弱而產生的疾病[1-2]，常見于中老年女性，嚴重影響其身心健康及生活質量。目前的治療手段尚不能完全修復受損組織[3]。骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)具有再生能力強及多向分化的優點[4-5]，且可分泌促進組織修復的生物活性因子[6]。彈性蛋白(Elastin)和賴氨酰氧化酶(lysyl oxidase，LOX)均由成纖維細胞分泌，前者是盆底細胞外基質的核心蛋白[7-8]，其合成減少及結構改變均可導致PFD，后者是一種作用于細胞外基質的關鍵酶，參與膠原和Elastin的合成[9]。KDM4B是組蛋白去甲基化酶Jmjd2家族的一員[10-11]，能夠特異性去除組蛋白3第9位賴氨酸的三甲基化(H3K9me3)，在促進干細胞成骨定向分化、炎癥、腫瘤發生等過程中發揮重要作用[12]。循環機械牽張(cyclic mechanical stretch,CMS)可調節細胞外基質的合成和分泌[13-15]，在維持細胞穩態中發揮重要作用[16]。本研究旨在探討CMS及KDM4B在BMSCs成纖維分化中的作用及表觀遺傳學調控機制，從而為臨床上應用BMSCs治療PFD提供依據。

1 材料與方法

1.1實驗動物和主要試劑7 d齡雌性SD大鼠購自鄭州大學實驗動物中心，動物合格證號：SCXK(豫)2016-0004。Percoll分離液(美國Phamacia公司)，胎牛血清、胰蛋白酶、α-MEM培養基(Gibco公司)，KDM4B兔抗鼠多克隆抗體、Elastin兔抗鼠多克隆抗體、LOX兔抗鼠多克隆抗……