人臍帶沃頓膠薄片對(duì)大鼠面神經(jīng)損傷后髓鞘的修復(fù)作用

李 牧，李東朋，宋 迪，趙成斌，岳賽超，馮 杰，楊 波，關(guān)方霞

1)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科 鄭州 450052 2)北京回龍觀醫(yī)院精神科 北京 102200

面神經(jīng)為周圍神經(jīng)重要的一支，由于其結(jié)構(gòu)和位置的特殊性，在外傷、手術(shù)、炎癥或腫瘤等情況下較易受到損傷，可引起部分或完全性面癱，嚴(yán)重影響面部美觀、功能及生活質(zhì)量[1]。面神經(jīng)損傷的藥物及手術(shù)治療效果欠佳，神經(jīng)功能恢復(fù)難以達(dá)到損傷前的水平，因此尋找有效的治療方法尤為重要。沃頓膠富含具有多向分化及神經(jīng)修復(fù)潛能的細(xì)胞，具有改善損傷局部微環(huán)境和神經(jīng)修復(fù)的作用[2]。本研究采用人臍帶沃頓膠薄片治療面神經(jīng)損傷模型大鼠，觀察髓鞘修復(fù)效果及電生理變化，測定損傷局部髓鞘蛋白及細(xì)胞因子的表達(dá)分布，探討可能的分子機(jī)制，為人臍帶沃頓膠薄片修復(fù)面神經(jīng)損傷奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑及儀器選用健康成年雌性Wistar大鼠64只，體重180～210 g，購自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(豫)2010-0002]。飼養(yǎng)條件符合清潔級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，環(huán)境溫度控制在22～24 ℃。HE染色試劑盒購于北京博奧森公司，髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)、 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)購于武漢博士德公司，ELISA試劑盒購自美國TSZ Biosciences公司。肌電圖誘發(fā)電位記錄儀[Keypoint 4(33A04)，Denmark公司]，電鏡(SMZ1000，尼康公司)。

1.2沃頓膠薄片制作人臍帶由鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科提供,捐贈(zèng)者均簽署知情同意書，經(jīng)檢測傳染性相關(guān)指標(biāo)均呈陰性后用于本實(shí)驗(yàn)。剝離臍帶外膜并分離去除動(dòng)靜脈后即為沃頓膠組織，剪成 5 mm3大小組織塊，置于培養(yǎng)皿中，加入5 mL無血清DMEM/F12培養(yǎng)基，于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。……