MS-275聯合順鉑對食管鱗狀細胞癌EC9706細胞氧化損傷和凋亡的影響

劉騰飛，王亞蘋，李 亞，張振坤，李 喆，周馨魁，張璐玉，王文杰，劉紅濤，張彥婷，關方霞，馬珊珊

鄭州大學生命科學學院 鄭州450001

食管癌是世界上常見的消化道惡性腫瘤之一，在我國，每年新發病例超過22萬例，死亡超過20萬例[1]。食管癌根據病理特征主要分為鱗狀細胞癌(鱗癌)與腺癌，在我國以鱗癌為主。順鉑(cis-diammine-dichloroplatinum，DDP)是臨床治療食管鱗癌的主要化療藥物之一，屬于細胞周期非特異性藥物，無明確的靶向組織，引發的不良反應也較多，其中腎毒性是DDP在臨床上大量使用的主要限制因素之一[2]。MS-275是一種組蛋白去乙酰化酶抑制劑，具有廣泛的抗人類腫瘤作用，對正常細胞的毒性小且臨床耐受性強[3]。本課題組前期的研究[4]表明，MS-275可降低食管鱗癌KYSE-70細胞存活率，有效抑制細胞遷移，阻滯細胞周期，促進細胞凋亡。有研究[5-7]表明MS-275和DDP均能夠通過調節細胞的氧化還原水平發揮抗腫瘤作用。本研究旨在探討MS-275聯合DDP對食管鱗癌EC9706細胞氧化損傷和細胞凋亡的影響，進而揭示MS-275聯合DDP對食管鱗癌的抗腫瘤作用。

1 材料與方法

1.1細胞和主要試劑EC9706細胞由鄭州大學第一附屬醫院細胞生物學實驗室保存，使用含體積分數10% 胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培養基于37 ℃、體積分數5% 的CO2培養箱內培養。MS-275和DDP(美國MCE公司產品)，FBS、RPMI 1640培養基購自以色列BI公司，CCK-8 試劑盒和Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒購自蘇州宇恒生物科技有限公司，活性氧(reactive oxygen speies,ROS)檢測試劑盒和JC-1 線粒體膜電位熒光探針購自北京索萊寶公司， 丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所，兔源Bax和Bcl-2購自武漢三鷹生物技術有限公司，鼠源硫氧還蛋白(thioredoxin,Trx)抗體購自美國圣克魯斯生物技術公司。……