王金金,秦國慧,楊 黎,張 毅
1)鄭州大學第一附屬醫院生物細胞治療中心 鄭州 450052 2)鄭州大學第一附屬醫院腫瘤中心 鄭州 450052 3)河南省腫瘤免疫與生物治療重點實驗室 鄭州 450052
食管癌的發病率居世界惡性腫瘤第8位,并是全球癌癥相關死亡的第6大原因[1]。食管鱗狀細胞癌是亞洲最常見的食管癌組織學類型,尤其在河南等地高發[2]。目前食管癌的常規治療手段包括手術、放化療等,但5 a生存率不足20%,且復發率較高[3],這就需要尋找一種新的治療方法以改善食管癌患者的預后。Msi1是一種RNA結合蛋白,能特異性地識別靶mRNA的3’非翻譯區(3’UTR),從而影響靶基因的翻譯。既往研究[4-9]發現Msi1可以通過影響細胞增殖、侵襲、上皮間質轉化等促進多種腫瘤的惡性轉化。本課題組的前期研究[10]結果顯示Msi1可以增強食管癌細胞的增殖、遷移及干細胞成球能力,但并未進一步探討其對腫瘤微環境的影響。CCL2是趨化因子CC亞家族的一員,即單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1),可以趨化單核細胞,影響其吞噬作用以及產生抗體。研究[11]表明血液中的單核細胞可在M-CSF、IL-4等細胞因子誘導下轉化為腫瘤相關的巨噬細胞(tumor associated macrophage,TAM),從而抑制腫瘤生長。本研究通過沉默食管鱗癌TE7細胞Msi1基因的表達,探究其對趨化因子分泌及免疫抑制細胞定向運動的影響。
1.1細胞與主要試劑食管癌TE7細胞系購自中國科學院上海細胞庫(TE7細胞系傳第5代,在含體積分數10%胎牛血清的RPMI 1640、37 ℃、含體積分數5%CO2的細胞恒溫培養箱中培養),RPMI 1640培養基、CBA定量試劑盒(捕……