大鼠頸動脈球囊損傷后單核細胞趨化蛋白-1誘導蛋白的表達變化

蹇明輝，陳文明，李朝富

(遵義醫科大學附屬醫院 心血管內科，貴州 遵義 563099)

目前，經皮冠狀動脈介入治療(percutaneous coronary intervention,PCI)是治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)最為有效的手段之一，但是，PCI術后血管再度狹窄(Restenosis,RS)的發生率仍然高達17%～32%[1-2]。在PCI術后血管再狹窄發生、發展的過程中，血管平滑肌細胞(Vasclar smooth muscle cell,VSMC)的過度增殖和遷移起著非常重要的作用[3]，如果能有效抑制VSMC過度的增殖和遷移，那么，PCI術后再狹窄的發生就有能得到有效的控制。單核細胞趨化蛋白-1誘導蛋白(Monocyte chemotactic protein-1 induced protein，MCPIP) 是一個具有轉錄活性，或有RNase活性的鋅指蛋白，參與細胞內的多種病理過程，研究表明MCPIP是與心血管疾病、炎癥、自身免疫等相關的一種多功能蛋白[4-6]。研究還證實，在動脈粥樣硬化模型鼠主動脈中，發現MCPIP mRNA 表達量比野生型鼠增加了2.5倍；在人的動脈粥樣硬化斑塊組織中發現 MCPIP 表達較正常血管組織明顯增加[7]。在PCI術后再狹窄進程中，MCPIP 是否參與其中，作者未見文獻報道。因此，本研究通過建立球囊損傷動脈模型，模擬PCI術后再狹窄的過程，探討血管損傷后MCPIP 的表達變化與血管新生內膜形成的關系。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器 MCPIP和β-actin一抗(北京博奧森生物技術有限公司)；RNA逆轉錄試劑盒和Real-Time PCR反應試劑盒(寶生物工程(大連)有限公司)；2.0 mm×12.0 mm球囊導管(美國Baxter Healthcare公司)；BX43顯微鏡(日本Olympus公司)；凝膠成像系統(美國BIO-RAD公司)；MCPIP和β-actin引物(廣州銳博生物科技有限公司)。

表1引物序列和擴增產物長度

引物名稱引物序列基因擴增片段長度MCPIP上游 TCGGCCAGATGTG CCTATCA191 bp下游 CTTGGAGGTCCCGGTATG TG TCβ-actin上游 CCACGAACTACCTTCAACTCC132bp下游 GTGATCTCCTTCTGCATCCTGT

1.2 實驗動物及分組 SPF級健康雄性SD大鼠50只(由重慶騰鑫生物技術有限公司提供)，體重 300±20 g，隨機為成 5 組：假手術組，損傷后3、7、14、28 d組，每組10只。……