雙歧桿菌聯(lián)合包裹液態(tài)氟碳陽離子脂質(zhì)納米粒增加HIFU消融效果：實(shí)驗(yàn)研究

高 懸，鄒建中*，蔣冰蕾，徐 蝶，羅 勇，

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院 省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地—重慶市超聲醫(yī)學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 重慶市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 重慶微無創(chuàng)醫(yī)學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心，重慶 400016；2.重慶醫(yī)科大學(xué)超聲影像學(xué)研究所，重慶 400010)

HIFU已廣泛用于治療實(shí)體腫瘤。由于超聲波在傳播過程中能量衰減較大，當(dāng)腫瘤體積較大或其位置深在時，HIFU療效會受到較大影響[1]。在靶區(qū)引入碘油、微泡等物質(zhì)，可通過改變組織的聲環(huán)境來增強(qiáng)HIFU消融效果；但這些物質(zhì)的靶向性不強(qiáng)，在腫瘤及其周圍組織器官內(nèi)均存在，輻照時易導(dǎo)致聲通道組織損傷[2-5]。近年來，研發(fā)體內(nèi)滯留時間長且靶向性強(qiáng)的HIFU增效劑逐漸受到關(guān)注。本研究探討HIFU生物靶向增效的可行性，以雙歧桿菌[5-7]作為載體，聯(lián)合包裹液態(tài)氟碳的陽離子脂質(zhì)納米粒，觀察其增強(qiáng)HIFU消融的效果。

1 材料與方法

1.1 雙歧桿菌培養(yǎng)及鏡下觀察 將長雙歧桿菌ATCC15707(重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系提供)于37℃、厭氧條件下，在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h，4℃條件下以1 000 r/min離心10 min。將細(xì)菌濃度調(diào)整至6×107/ml備用。革蘭氏染色后于光學(xué)顯微鏡下觀察雙歧桿菌形態(tài)，并采用Malvern ZEN3600型分析儀測量其表面電位。

1.2 包裹液態(tài)氟碳的陽離子脂質(zhì)納米粒制備及鏡下觀察 將二棕櫚酰基卵磷脂(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine， DPPC；Avanti公司)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基{1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[amino(polyethylene glycol)-2000]，DSPE-PEG2000-Amine；Avanti公司}、膽固醇鹽酸鹽(DC-cholesterol hydrochloride， DC-CHOL；Avanti公司)按5∶2∶2的比例溶于氯仿中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑成膜，加入雙蒸水洗脫后，滴加100 μl液態(tài)氟碳全氟己烷(perfluorohexanes， PFH；……